妊娠期高血压疾病miRNA的表达谱及基因表达调控的研究

miRNA基因表达调控在妊娠期高血压疾病(HDCP)发病中的作用尚未报道。我们的前期工作已首次构建了孕妇血浆中和正常胎盘组织中miRNA的表达谱，鉴定了胎盘特异性miRNA的表达, 证明了miRNA是通过exosome形式分泌到细胞外，明确了由母体血浆能够监测胎盘特异miRNA。本研究拟通过高效率克隆miRNA技术，构建HDCP胎盘的miRNA表达谱，并用Real-tinme PCR和原位杂交技术鉴定HDCP特异性miRNA的表达情况, 从而探讨血浆特异性miRNA对HDCP的早期诊断价值；同时培养细胞水平上通过过剩或抑制表达HDCP特异性miRNA来降低或提高蛋白表达量, 来筛选miRNA的靶位点，探讨基因表达调控，来揭示HDCP发病中的作用，分析特异性miRNA与HDCP相关因子sFlt-1、 PLGF、 endoglin间的关系，为HDCP机制研究及药物治疗提供新靶点和科学依据。

妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy, HDCP)简称妊高症，是一种原因不明的妊娠期多系统疾病，目前仍是全球性的产科难题，是孕妇和围产儿死亡的重要原因。MicroRNA（miRNA）基因表达调控在HDCP发病中的作用尚不清楚。本课题通过高效率克隆miRNA和Real-time PCR芯片技术，构建了HDCP胎盘的miRNA表达谱，发现22个miRNA表达显著上调，其中对于miRNA-210，miRNA-518c和miRNA-20a用Real-time PCR和原位杂交技术鉴定了HDCP胎盘组织中的表达特点，同时在培养细胞水平上通过过剩或抑制表达miRNA来降低或提高蛋白表达量及采用荧光素酶检测技术, 证实了miRNA-210及miRNA- 518c的靶向抑制基因hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase1（HSD17B1）和miRNA-20a的靶向抑制基因Forkhead box protein A1 (FOXA1)之间的关系，进一步在临床水平上探讨发现在HDPC的先兆子痫患者血浆中HSD17 B 1的表达与正常孕妇对照组相比显著降低，为其可以作为预判病程进展的生物标记提供了理论基础，将为病程进展的早期诊断提供有意义的价值。同时我们发现HDPC的先兆子痫患者胎盘组织中升高的miR-20a对胎盘滋养层细胞JEG-3的增殖、迁移和侵袭均产生抑制作用，且其作用机制是通过靶向抑制FOXA1产生的，揭示了胎盘滋养细胞增殖侵润能力受损，使胎盘血管网络生长发育不良，从而造成滋养细胞缺血缺氧病理过程的又一作用机制。通过本课题的研究明确了HDCP相关miRNA的表达普，揭示了特异性miRNA与HDCP相关因子HSD17β1、FOXA1之间的关系，将为HDCP发病机制的研究及药物治疗提供新靶点和科学依据。