抗乳腺癌人单抗(CM-1)V区cDNA的克隆与表达

由分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM-1提取RN，按该抗体特点设计引物，逆转录cDNA，PCR扩增VH和VL片段，克隆并测序。获得了全长354bp的VH基因，其碱基序列属人重链基因亚组II，氨基酸测序分析表明其具有人抗体特征性空间结构。VL（λ）基因属λ链亚组II，将VH和VL基因与表达质粒PWA180重组，构建了CM-1单链抗体PWCM-1，IPTG诱导抗体表达，37℃培养6h菌体裂解液的抗体活性为对CM-1阳性抗体的抑制率达70%。表明诱导的抗体可特异性地与人乳腺癌结合。本研究为人源性单抗的制备和基因留存探索了新的实用路线。CM-1单链抗体可很大的提高抗体导向定位能力，为乳腺癌的诊断和导向治闻中开辟了广阔的应用前景。该人的单链抗体国内尚未见到报道。