NPR1基因甲基化沉默在胃癌转移和侵袭中的作用机制研究

明确胃癌细胞转移和侵袭机制，对于临床治疗和预后判断具有重要意义。研究发现，抑癌基因DNA甲基化等表观遗传学改变可导致基因表达沉默，由此赋予癌细胞更高侵袭性或转移优势生长。我们前期应用基因芯片对胃癌前哨淋巴结转移前后表达谱进行分析，发现多个基因转移后表达沉默。通过亚硫酸氢盐修饰PCR测序分析，我们首次发现表达沉默的NPR1基因启动子区存在CpG岛并在胃癌细胞中存在甲基化畸变。本项目即在此研究基础上，采用启动子荧光素酶报告分析、去甲基化药物处理和免疫沉降的方法，分析NPR1基因表达沉默的表观遗传学机制；同时构建NPR1全长mRNA表达载体并转染到表达沉默胃癌细胞中，对细胞进行克隆成形分析、侵袭分析和转移分析，确认NPR1基因在胃癌转移中的关键作用；最后大样本分析NPR1基因甲基化畸变和临床进展和预后的关系，从而系统阐明NPR1基因在胃癌转移中的功能和调控机制，为临床抑制胃癌转移提供新思路。