不同脏腑虚损COPD患者衰老程度与SIRT1基因SNPs相关性及SIRT1信号通路的调节机制研究

There are views about "COPD is a disease of accelerated lung aging ".Our previous studies found that COPD patients with different viscera deficiency is different in clinical symptom and disease developing speed.So we think the degree of viscera deficiency in COPD patients has certain correlation with the degree of aging. Telomere length can reflect the degree of aging and disease severity;Some age-related biomarkers, such as SIRT1 thought to be closely related to the pathogenesis of COPD.This topic is to discuss the relevency of viscera deficiency，aging and SIRT1 SNPs by measuring telomere length and telomerase activity of peripheral blood mononuclear cells and three SIRT1 gene loci of SNPs in COPD patients;By the animal experiments, adopting the random parallel control experimental methods, intervention with SIRT1 agonist, inhibitors, apply molecular biology technology as PCR array, western blot, immunohistochemical to demonstrate the regulation of SIRT1 associated signaling pathway in the development of COPD and the conduction differences in different viscera deficiency in COPD patients.Provide the basis for treating COPD in Viscera syndrome differentiation, and to explore new ways for the research of COPD.

有观点提出“COPD是加速的肺老化疾病”。本课题组前期的研究发现，COPD稳定期不同脏腑虚损患者在临床症状和疾病发展速度等方面存在差异性。因此我们认为COPD患者脏腑虚损程度与衰老存在一定的相关性。端粒的长度可以反映衰老的程度及疾病的严重程度；一些衰老相关的标志物，如SIRT1被认为与COPD的发病密切相关。本课题欲通过测定不同脏腑虚损COPD患者外周血单核细胞端粒长度及端粒酶活性，通过基因测序技术测定SIRT1基因三个位点的SNPs，以阐释脏腑虚损与衰老及SIRT1SNPs的相关性；并通过动物实验，采用随机平行对照的实验方法，以SIRT1激动剂、抑制剂干预，应用PCR-array、western-blot、免疫组化等分子生物学技术验证SIRT1相关信号通路在COPD发展过程中的调节作用及在不同脏腑虚损COPD患者中的传导差异。为脏腑辨证治疗COPD提供依据，并为COPD研究探索新的途径。

有观点提出“COPD是加速的肺老化疾病”。本课题组前期的研究发现，COPD稳定期不同脏腑虚损患者在临床症状和疾病发展速度等方面存在差异性。.本课题围绕“不同脏腑虚损COPD患者衰老程度与SIRT1基因SNPs相关性及SIRT1信号通路的调节机制”这一科学问题，通过测定不同脏腑虚损COPD患者外周血单核细胞端粒长度及端粒酶活性以及各组患者SIRT1基因rs2236319、rs7069102、rs2273773、rs7895833这四个位点的SNPs；并通过动物实验，采用随机平行对照的实验方法，建立COPD大鼠模型，并以SIRT1激动剂、抑制剂干预，应用rtqPCR、ELISA等分子生物学技术验证SIRT1相关信号通路在COPD发展过程中的调节作用及在不同脏腑虚损COPD患者中的传导差异。通过本项目资助，我们发现慢阻肺患者衰老程度较健康正常人显著，并且发现rs7069102和rs7895833这两个SNP位点与COPD存在显著关系其中，rs7895833这个SNP位点与COPD（肺气虚组）存在显著关系。通过动物实验发现，COPD模型大鼠P21、P53表达显著升高，自噬显著增强（LC3B、beclin-1），SIRT1能够抑制FOXO1和FOXO3a表达，改善Klotho表达，但同时会抑制MnSOD表达，降低自噬标志物LC3B表达以及自噬调节关键蛋白beclin-1的表达，提示COPD可能通过sirt1-FOXO1通路调节慢阻肺患者肺组织自噬水平，从而影响疾病进展。本项目针对慢阻肺衰老程度差异及SIRT1和自噬及衰老相关标志物的调节作用展开研究，为从衰老角度探讨慢阻肺的发病机制及治疗新靶点的研究提供了新的思路，对开拓慢阻肺发病及疾病进展机制及治疗的新方法具有重要的理论价值和潜在的应用前景。