Lnc-MRPL39-2:1在鼻咽癌上皮间充质转化过程中的作用和分子机制探讨

We have found that lnc-MRPL39-2:1, which is up-regulated in the nasopharyngeal carcinoma (NPC) tissue compared with adjacent non-tumor tissue, can promote the processes of EMT of NPC cells. Our studies have confirmed that lnc-MRPL39-2:1 could bind to miR-329 and decrease its expression level through reducing its half-life. The lnc-MRPL39-2:1 interactive with HuR directly to stabilization expression of JAMA which in turn promotes the NPC cells’EMT. Based on our preliminary data, we first hypothesize that lnc-MRPL39-2:1 play a vital role in the migration and invasion of NPCs. To test the hypothesis, firstly, we will explore the physiological and functional roles of lnc-MRPL39-2:1 in EMT of NPC cells by in vitro and in vivo; secondly, we will deeply detect the mechanism of in EMT of NPC cells by using RIA-seq，RNA pull down assay and mass spectrometry. Finally, the effect of lnc-MRPL39-2:1 and its related effectors will be identified by clinical multicenter sample of NPCs. From this work, the functional role of lnc-MRPL39-2:1 in the EMT of NPC and its progression will be explored and this will be helpful to discover lnc-MRPL39-2:1 as a potential therapeutic target in patients with NPCs.

我们前期发现，鼻咽癌组织中显著上调的lnc-MRPL39-2:1能促进鼻咽癌细胞EMT过程；位于胞浆中的lnc-MRPL39-2:1与miR-329结合，半衰期被缩短从而表达水平降低；与HuR直接结合，进而稳定JAMA mRNA，提高JAMA蛋白表达，促进EMT。据此我们首次提出：lnc-MRPL39-2:1是鼻咽癌复发和转移的关键基因之一。本项目拟通过体内外实验探讨其在鼻咽癌中生物学功能；并利用RNA pull down、质谱、RIA-Seq 等技术探讨其促进鼻咽癌EMT的分子机制；再通过临床多中心大样本检测lnc-MRPL39-2:1及其相关蛋白质、miRNA在预警鼻咽癌侵袭和转移等方面的作用。本项目将揭示lnc-MRPL39-2:1在鼻咽癌侵袭和转移中的作用机制，对鼻咽癌的治疗抵抗，远处转移及预后判断具有重要的理论价值，为鼻咽癌治疗的新靶点提供充分理论依据。

1.长链非编码RNA（Long non-coding RNAs, lncRNAs）能通过多种不同的机制调节肿瘤进展和治疗敏感性。然而，lncRNAs在鼻咽中的作用研究尚不清楚。因此，我们研究了lncRNAs在鼻咽癌中的作用。通过比较鼻咽癌和癌旁组织，我们通过芯片检测比较癌和癌旁组织的lncRNA，发现了一些差异表达lncRNA。lnc-MRPL39-2:1是其中一个在鼻咽癌中高表达的lncRNAs。因此，我们对其在鼻咽癌中的作用和其机制进行了研究，功能及机制研究发现，过表达lnc-MRPL39-2:1能促进鼻咽癌细胞侵袭和迁移，与鼻咽癌患者不良预后密切相关。进一步的研究发现，lnc-MRPL39-2:1通过HuR稳定 β-catenin mRNA的表达水平。另外，miR-329能作用于lnc-MRPL39-2:1，降低miR329的稳定性。总之，这些结果提示我们，lnc-MRPL39-2:1能作为鼻咽癌预后和治疗的重要标志物之一。.2.胶质母细胞瘤（Glioblastoma，GBM）是原发性脑肿瘤中最常见和侵袭性最强的一类肿瘤。尽管包括手术，术后放疗以及替莫唑胺治疗等的胶质母细胞瘤的治疗手段有了很大的进展，但是大部分患者综合治疗几年后仍不可避免地出现复发。外泌体能介导免疫微环境the tumor microenvironment (TME) 中肿瘤细胞与免疫细胞，肿瘤细胞与环境的相互作用。本项研究放疗后的胶质母细胞瘤是否通过外泌体影响免疫微环境，最终导致肿瘤的复发和进展。研究结果显示，胶质母细胞瘤放疗后的外泌体能在体内外抑制T细胞的抗肿瘤免疫。机制研究结果显示，放疗能通过促进ATM-Alix相互作用，促进外泌体生成和分泌。另外，ATM能磷酸化STAT3，磷酸化的STAT3结合至B7-H4启动子区，增加B7-H4表达。最后，放疗诱导的B7-H4运送至Th1细胞中，通过STAT1促进FOXP3的表达，最后促进免疫微环境中的T细胞出现免疫抑制。体内实验结果显示，外泌体B7-H4能下调胶质母细胞瘤的放疗敏感性，促进GBM肿瘤的生长。总之，外泌体B7-H4能作为胶质母细胞瘤的预后和治疗标记物。放疗联合抗B7-H4治疗可能能改善患者局部控制和生存。