载脂蛋白B mRNA编辑催化多肽3G(APOBEC3G)抗病毒机制研究

APOBEC3G作为抗HIV的宿主抑制因子，明确的抑制HIV复制的机制仍未阐明。本申请深入研究APOBEC3G抑制HIV复制的机制，明确酶活性依赖和非依赖的抑制活性对其总体抗病毒作用的贡献。研究APOBEC3G（野生型和酶活性缺失突变型）、HIV-1的NC蛋白和RNA（病毒和宿主）之间的相互作用对APOBEC3G病毒包装和其抑制HIV病毒早期DNA逆转录产物、晚期DNA逆转录产物以及原病毒DNA整合过程中的意义，分析野生型和酶活性缺失突变型在HIV复制过程中的抑制活性的区别，同时对HIV病毒序列测定，确定病毒G-A突变和其余突变产生的频率，分析这些突变的产生对HIV转录后、病毒装配、出芽和感染性的影响，明确酶活性对APOBEC3G抗病毒活性的总体贡献。本研究阐明APOBEC3G的抗HIV-1活性的作用机制，为以APOBEC3G靶点设计新型抗HIV的治疗药物提供理论依据。

APOBEC3G作为抗HIV的宿主抑制因子，明确的抑制HIV复制的机制仍未阐明。我们在前期工作的基础上，深入研究APOBEC3G抑制HIV复制的机制，明确酶活性依赖和非依赖的抑制活性对其总体抗病毒作用的贡献，研究证实研究APOBEC3G酶活性非依赖在抗病毒作用中具有重要作用。APOBEC3G抑制HIV-1病毒逆转录反应的起始需要其和病毒NCp7的相互作用，并且APOBEC3G还可以抑制病毒逆转录反应的链延伸，这种抑制作用需要Gag多蛋白的成熟化为NCp7，而APOBEC3G抑制NCp7介导的引物退火和之后的引物起始以及延伸。我们在研究中发现包装到病毒颗粒中的APOBEC3G可以被HIV-1蛋白酶剪切，提示除Vif外，HIV-1可能还有另外的途径拮抗APOBEC3G的抗病毒活性。同时研究了宿主限制因子BST-2抑制HIV-1病毒样颗粒及主要功能作用位点研究，并且BST-2抑制流感病毒样颗粒释放研究，发现BST-2可抑制流感病毒HA和NA形成的病毒样颗粒的释放，进一步的研究结果证实流感病毒编码的M2可以降解BST-2。研究证实BST-2可以抑制XMRV病毒的细胞释放，并对BST-2的主要功能决定区进行了详细研究。利用BRET方法研究了Vpu和BST-2跨膜区精细的突变分析，得到了对于两者相互作用重要的新的位点，并进行了功能验证。本研究探索了APOBEC3G和BST-2的抗病毒作用作用机制，为以APOBEC3G和BST-2为靶点设计新型抗病毒治疗药物提供理论依据。