基于SOCS1/TLR4-Myd88-MAPK通路探讨祛痰活血方调控NF-kB激活治疗NASH作用机制研究

NASH is an important step in the progress of NAFL, liver fibrosis, liver cirrhosis and even liver cancer, NF-kB abnormal activation of NASH is one of the important reasons for the development. Clinical trials confirmed that QutanHuoxue Recipe is an effective prescription for the treatment of NASH, its efficacy and inhibition of apoptosis. It was confirmed that QutanHuoxue Recipe could regulate the activation of NF-kB and regulate the expression of NF-kB in combination with SOCS-1 and TLR4-Myd88-MAPK pathway. The hypothesis: QutanHuoxue Recipe by downregulating Kupffer cells SOCS-1, down-regulating TLR4 expression, inhibits NF-kB activation by exerting anti-NASH effect. The rat model of NASH induced by high fat diet and the cohort system of primary Hepatocyte.Observe the effect of QutanHuoxue Recipe on the expression of SOCS-1, TLR4 and Myd88 in Kupffer cells and its correlation with NF-kB activation,Investigate the interaction mechanism of SOCS1 / TLR4-Myd88-MAPK pathway in control of NF-κB activation in Kupffer cells by QutanHuoxue Recipe regulation,to clarify the partial immune mechanism of QutanHuoxue Recipe against NASH

NASH是NAFL进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌的重要环节，NF-kB异常激活是NASH发生发展的重要原因之一。临床试验证实祛痰活血方是治疗NASH的有效方剂，其疗效与抑制细胞凋亡有关。前期证实祛痰活血方可以调控NF-kB的激活，结合SOCS-1与TLR4-Myd88-MAPK通路的交互作用调控NF-kB表达的机制，提出假说：祛痰活血方通过上调Kupffer细胞SOCS-1、下调TLR4的表达，抑制NF-kB激活发挥抗NASH作用.应用高脂饮食诱导的NASH大鼠模型及原代NASH模型大鼠Kupffer细胞和原代肝细胞共培养体系，观察祛痰活血方对肝内Kupffer细胞SOCS-1、TLR4、Myd88表达的影响及其与NF-kB激活的相关性，探讨祛痰活血方调控Kupffer细胞SOCS1/TLR4-Myd88-MAPK通路控制NF-kB激活的交互作用机制，明确祛痰活血方抗NASH的部分免疫机制

NAFLD已发展为全球最常见慢性肝病，NASH是NAFL进展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌的重要环节，其中NF-κB是NASH重要的炎症基因转录调控因子，祛痰活血方是治疗NASH有效验方，能够调控NF-kB的激活。为明确中医复方作用机制，本研究主要内容及结果包括：1.建立两种不同的NASH动物模型，对比TLR4/Myd88/NF-κB通路中的差异，验证了祛痰活血方的作用机制；2. 提取NASH大鼠模型原代Kupffer细胞和肝细胞，建立共培养体系，明确了祛痰活血方通过SOCS1-TLR4/Myd88/NF-κB通路调控NF-kB激活减轻肝细胞损伤的作用机制；3.拓展研究发现祛痰活血方上调脂肪细胞AQP7、下调肝细胞AQP9减轻NAFLD大鼠肝细胞脂质蓄积的作用机制。本研究初步探索了祛痰活血方改善NASH肝损伤的部分作用机制，其作用机制可能与上调SOCS1表达抑制TLR4/NF-κB信号通路激活有关，进一步加入TLR4/NF-κB信号通路关键信号分子抑制剂，证明祛痰活血方改善NASH肝损伤的作用机制为上调SOCS1表达抑制TLR4/NF-κB信号通路激活，但因中医复方的多靶点性，仍存在其他通路调控可能，需进一步探索研究。扩展研究中，发现祛痰活血方改善NASH脂肪变性的作用可能与调节脂肪细胞和肝细胞中的水-甘油通道蛋白AQP7、AQP9的表达相关。本研究成果共发表论文6篇，其中SCI 2篇，北大中文核心3篇，科技核心1篇，培养硕士3名，博士1名，新立项国自然科学基金1项，获得2020年中华中医药学会科技进步三等奖1项，推动专科获批“川派-孙氏肝病流派工作室”、“国家中医肝病区域诊疗中心”及“国家中医药临床研究基地”。该复方现广泛应用于上海中医药大学曙光医院、广东省中医院、湖南中医药大学第一附属医院等150余家省市级医院及基层医疗单位，提高了其中医治疗门诊及住院NALFD患者的疗效。