雷公藤多糖对胰岛来源的胰腺干细胞诱导分化作用的研究

Diabetes is one of the main diseases affecting human health, research shows that pancreatic stem cells is a new approach to the treatment of diabetes,and how effective it will be induced to differentiate into pancreatic beta cells becomes the key problem of stem cell therapy of diabetes. Our previous studies find that:1.Islets derived pancreatic stem cells have the potential to beta cell differentiation,2. Tripterygium wilfordii polysaccharide has obvious hypoglycemic effect,3.Hypoglycemic effect of the polysaccharide from Tripterygium Wilfordii works by increasing the number of beta cells and enhancing insulin release . Therefore, we have reasons to believe that Tripterygium wilfordii polysaccharide can induce islets derived pancreatic stem cells to differentiate into beta cells under suitable conditions,to confirm this working hypothesis, this project aims to obtain a large number of islets derived pancreatic stem cells in vitro by a a set of techniques and methods we established, and after the purification of Tripterygium wilfordii polysaccharide by orthogonal testing method, chromatography and the thin layer method, pancreatic stem cell of islets sources are induced to beta cells by Tripterygium wilfordii polysaccharide, then a series of detection are launched in order to understand the effect of Tripterygium wilfordii polysaccharide on pancreatic stem cells differentiation induction.The research results will provide new theoretical basis for the application of traditional Chinese medicine in the treatment of diabetes, and are expected to bring broad application prospects for pancreatic stem cell transplantation therapy of diabetes.

糖尿病是影响人类健康的主要疾病之一，研究表明胰腺干细胞是糖尿病治疗的新途径，而如何有效地将胰腺干细胞诱导分化为胰岛β细胞成为了干细胞治疗糖尿病的关键问题。本课题组前期的研究工作发现：①来源于胰岛的胰腺干细胞具有向β细胞分化的潜能；②雷公藤多糖具有明显的降血糖作用；③雷公藤多糖的降血糖作用与其能增加胰岛β细胞数量及增强β细胞释放胰岛素的功能有关。因此我们有理由认为雷公藤多糖在适当的条件下可以诱导胰岛来源的胰腺干细胞分化为胰岛β细胞，为证实这一工作假说，本项目拟通过课题组建立的一套技术方法体外获得大量胰岛来源的胰腺干细胞，并在通过正交试验法、层析法和薄层法获得纯化的雷公藤多糖后， 对胰岛来源的胰腺干细胞进行诱导分化，并展开一系列的检测以了解雷公藤多糖对胰腺干细胞的诱导分化作用。研究结果将为应用中医药治疗糖尿病提供新的理论依据，并有望为胰腺干细胞移植治疗糖尿病带来广阔的应用前景。

糖尿病是影响人类健康的主要疾病之一，研究表明胰腺干细胞是糖尿病治疗的新途径，而如何有效地将胰腺干细胞诱导分化为胰岛β细胞成为了干细胞治疗糖尿病的关键问题。本课题组前期的研究工作发现：①来源于胰岛的胰腺干细胞具有向β细胞分化的潜能；②雷公藤多糖具有明显的降血糖作用；③雷公藤多糖的降血糖作用与其能增加胰岛β细胞数量及增强β细胞释放胰岛素的功能有关。因此我们有理由认为雷公藤多糖在适当的条件下可以诱导胰岛来源的胰腺干细胞分化为胰岛β细胞，为证实这一工作假说，本项目通过课题组建立的一套技术方法体外获得了大量胰岛来源的胰腺干细胞，并在通过正交试验法、层析法和薄层法获得纯化的雷公藤多糖后，摸索出雷公藤多糖的最佳作用浓度和最佳作用时间从而对胰岛来源的胰腺干细胞进行了诱导分化，诱导分化结束后展开了一系列的检测以了解雷公藤多糖对胰腺干细胞的诱导分化作用，研究结果表明雷公藤多糖连续诱导后，胰腺干细胞中形成了球形的胰岛样细胞团结构，双硫腙染色呈阳性；通过透射电镜观察，发现经雷公藤诱导形成的胰岛样细胞团的细胞胞浆中出现较多的分泌颗粒和粗面内质网，体现出了活跃的蛋白质分泌能力，提示了胰腺干细胞朝胰岛β细胞分泌的趋势；Western blot 检测也证明胰岛样细胞团表达β细胞素蛋白；糖刺激实验中使用不同浓度的葡萄糖分别刺激诱导形成的胰岛样细胞团后，采用酶链免疫吸附实验测定在不同糖浓度刺激下细胞团的胰岛素释放量，发现雷公藤多糖诱导胰腺干细胞体外分化形成的胰岛样细胞团并没有产生耐糖性，而且，诱导形成的胰岛样细胞团胰岛素释放量能随糖刺激浓度升高而显著增加。所有研究结果将为应用中医药治疗糖尿病提供新的理论依据，并有望为胰腺干细胞移植治疗糖尿病带来广阔的应用前景。