诱导人胰腺干细胞向胰岛细胞分化的新策略研究

利用已建立的人胰腺干细胞系进行本项目的研究。通过体外基因转染技术，建立稳定的人胰岛素启动子-绿色荧光蛋白（HIP-GFP）标记的单克隆人胰腺干细胞系，为分化结果鉴定提供监测体系。采用共培养或条件培养基的策略，将干细胞与胎儿胰岛样细胞簇（ICCs）或成人胰岛共培养，探讨人胰腺干细胞体外分化为胰岛细胞的最佳条件。收集胎儿ICCs培养上清液用于制备条件培养基，以同一来源的胎儿肝细胞培养上清液作为对照，研究该条件培养基对人胰腺干细胞分化的作用。建立干细胞来源的胰岛细胞移植的动物模型，移植前后动态监测血糖和C-肽水平的变化，并在移植后不同时期取出移植物，进行组织学和分子生物学分析，以评价移植的有效性和安全性。采用蛋白质组学方法，分析上述两种培养上清液与干细胞孵育前后蛋白质表达谱的差别，以确定具有促进人胰腺干细胞分化为胰岛细胞的关键蛋白质分子。本课题的完成将为干细胞技术用于糖尿病治疗领域奠定基础。