赤水金钗石斛对实验性糖尿病肾病的防治作用

糖尿病肾病肾功能衰竭是重要的致死原因之一。本课题组在研究石斛品种鉴定、有效成分的提取、以及药理作用机制中，发现其对实验性炎症细胞因子改变、能使高血糖大鼠血糖降低；实验性糖尿病肾病模型制作中大鼠用药2周后出现肾脏组织病例改变。以此为工作基础：在大鼠糖尿病肾病模型的基础上，拟用赤水金钗石斛浸膏和多糖预处理及治疗用药糖尿病肾病大鼠，检测肾脏病理和电镜观察肾细胞结构、肾功能检测,血中肌酐、SOD、NO和丙二醛,尿中蛋白测定；检测肾皮质晚期糖基化终产物（RAGE） mRNA和蛋白的表达情况。用糖基化终产物(AGEs)抑制剂和金钗石斛浸膏及多糖对比研究其对大鼠糖尿病肾组织中AGEs及其受体基因表达的影响，以及iNOS基因表达情况。本课题在一定深度分子水平上探讨金钗石斛浸膏及多糖对糖尿病肾病的防治机理，有重要意义。

摘要：.糖尿病肾病（DN）又称糖尿病肾小球硬化症，是糖尿病全身性微血管合并症。预防和延缓DN的发生和发展对提高糖尿病患者生存有重要的意义。本项目探讨赤水金钗石及其有效成分多糖和石斛碱对DN的防治作用及其机理。.本项目在建立糖尿病大鼠模型基础上，用赤水金钗石斛水提物灌胃后12周发现各组大鼠血糖、糖化Hb 、血尿素降低；24h尿白蛋白下降；肌酐清除率增加，并呈剂量依赖关系；肾组织T-SOD活性增强、MDA和肾脏指数降低。大鼠肾小球体积比较模型组有减小，抑制AGEs的形成、下调RAGE mRNA及蛋白的表达、抑制非酶糖基化和氧化应激的发生。.研究赤水金钗石斛总多糖提取，经DEAE-FF进行分离纯化和光谱法鉴定。多糖纯化后得组分FDP1，其相对含量为98.1%。用此多糖不同剂量作用于HBZY-1细胞，发现赤水金钗石斛多糖FDP1使细胞内ROS增加；多糖各剂量组对高糖诱导的细胞增殖无影响；上调高糖作用下细胞内的NQO1mRNA表达；增加了细胞内Nrf2mRNA、Nrf2的表达，促进细胞Nrf2蛋白的核转位。.本研究结果说明：①赤水金钗石斛水提物通过降低血糖、尿蛋白、抑制AGEs的形成、金钗石斛具有降低血糖、抑制AGEs的形成、下调RAGE mRNA和RAGE蛋白的表达、抑制氧化应激的作用，从而延缓糖尿病肾病的发生发展。② 金钗石斛多糖FDP1可能参与激活Nrf2/Keap1-ARE通路,从而强化激活细胞的自我保护机制，维持细胞内氧化还原稳态，最终达到对DN的保护作用。本项目对赤水金钗石斛的开发和抗DN增加了新内容。