以Her2/neu为靶点的新型VLP疫苗免疫应答研究

肿瘤相关抗原用于治疗性疫苗研发已成为恶性肿瘤治疗新策略。癌基因产物HER2因其表达于细胞膜表面、可诱发自身体液和细胞免疫反应、抗体治疗有效率达37%而备受关注；病毒样颗粒（VLP）技术成功用于宫颈癌疫苗制备并投放市场，对VLP肿瘤疫苗的研发推波助澜。本课题拟结合Her2/neu及VLP优势，借助HIV-Gag结构蛋白并应用杆状病毒表达系统制备Her2/neu嵌合VLPs，Western blot、电镜及共聚焦显微镜检测VLP组装效率及抗原呈现特性，使其激发免疫应答效应最大化；同时构建以细胞免疫应答为主的Her2/neu DNA疫苗，单独或联合VLPs疫苗免疫BALB/c鼠，ELISA、细胞ELISA、ELISPOT及流式细胞仪等检测小鼠体内抗体和细胞免疫效果；以D2F2/E2细胞制备荷瘤小鼠，观察上述疫苗体内抑瘤效果及对动物生存期影响，最终为乳腺癌疫苗治疗策略提供新思路。

肿瘤相关抗原用于治疗性疫苗研发已成为恶性肿瘤治疗新策略。癌基因产物HER2因其表达于细胞膜表面、可诱发自身体液和细胞免疫反应、抗体治疗有效率达37%而备受关注；病毒样颗粒（VLP）技术成功用于宫颈癌疫苗制备并投放市场，对VLP肿瘤疫苗的研发推波助澜。本课题结合Her2/neu及VLP优势，借助SIV-Gag结构蛋白并应用杆状病毒表达系统制备Her2/neu嵌合VLPs，Western blot、电镜检测VLP组装效率及抗原呈现特性；同时构建以细胞免疫应答为主的Her2/neu DNA疫苗，单独或联合VLPs疫苗免疫BALB/c鼠，在小鼠体内进行了抗肿瘤免疫效果研究。实验结果表明与DNA疫苗相比，该VLPs可成功激发小鼠体内免疫应答反应，产生血清抗VLPs的抗体，表明该疫苗具有良好的免疫原性，可成功激发鼠体内的体液免疫。同时，VLPs免疫后接种Her/neu+小鼠乳腺癌细胞EMT6，小鼠成瘤时间明显增加，肿瘤体积减小，表明该VLP对荷瘤鼠具有一定的治疗作用，该疫苗可在一定程度上抑制肿瘤生长。该研究结果为构建既能提高肿瘤特异性免疫反应，又能有效阻断肿瘤免疫逃避的肿瘤疫苗设计提供新的策略。