顺铂介导的DNA损伤反应在膀胱癌肿瘤干细胞样细胞中耐药的作用机制研究

The drug or radiation resistant are rely on the DNA damage response (DDR).The DDR (cell cycle checkpiont,DNA repair and apoptosis ) decides the fate of cell upon the DNA damage.The DDR are varied among diferent tissue-oringed and cell statue (stem cell or diferented cell).The drug-resistant is the hallmark of cancer stem cell,but little was known about mechanism related DDR in the cancer stem cell.Previously we confirmed and identified the cancer stem cells in human bladder cancer and found the overexpression of XPC and Chk2 in DDR related gene set. This noval finding hints that XPC is involve in the checkpoint regulation as an important initial factor upon the cisplatin-mediated DNA damage response beside to playing a role in nucleotide excision repair(NER) pathway. The molecular mechanism will be investigated how over expression of XPC lead to the distingished DDR in bladder cancer stem cell from non cancer stem cell in the project. This project will provide new insight into understand molecular mechanism of chemotherapy resistant in human bladder and new potential molecular target for cancer therapy.

最新研究表明肿瘤对化疗和放疗的敏感性取决于DNA损伤应答反应（DDR），DNA损伤反应中细胞周期调控，DNA修复和凋亡决定了对上述治疗的敏感还是耐受。而不同分化状态的细胞和不同组织来源的细胞对于DNA损伤导致的DDR存在着显著差异。耐药是肿瘤干细胞的重要特征。但肿瘤干细胞与DDR相关的耐药机制并不清楚。我们前期运用侧群细胞，顺铂耐药富集，和CD44分选等策略证实了膀胱癌中存在着肿瘤干细胞，具有干性和耐药的特征，并发现与DDR相关基因组群中XPC和Chk2过度表达，提示它们在膀胱癌干细胞顺铂介导的DNA损伤的DDR中可能起关键作用。由于XPC是DNA损伤最早的识别蛋白。除了经典的DNA修复作用，它在DDR中可能参与DDR的核心checkpiont调控作用，表现出膀胱肿瘤干细胞有别于已分化细胞的DDR特征。探明上述可能的分子机制从崭新的角度对于理解膀胱癌的耐药具有重要理论意义和潜在的应用价值。

最新研究表明肿瘤对化疗和放疗的敏感性取决于DNA损伤应答反应（DDR），DNA损伤反应中细胞周期调控，DNA修复和凋亡决定了对上述治疗的敏感还是耐受。而不同分化状态的细胞和不同组织来源的细胞对于DNA损伤导致的DDR存在着显著差异。耐药是肿瘤干细胞的重要特征。但肿瘤干细胞与DDR相关的耐药机制并不清楚。我们前期运用侧群细胞，顺铂耐药富集，和CD44分选等策略证实了膀胱癌中存在着肿瘤干细胞样细胞，具有干性和耐药的特征。在本研究中我们通过多种肿瘤细胞的悬浮培养成球实验富集肿瘤干细胞，发现SWI/SNF复合体中的SNF5蛋白表达显著降低，提示SNF5表达抑制是肿瘤干细胞维持的重要事件，进一步将通过慢病毒载体沉默SNF5，膀胱细胞表现出肿瘤干细胞的特性（耐药，高侵袭性和干性基因表达增高），以SNF5低表达为特征的膀胱癌细胞在顺铂损伤介导的DNA修复能力显著增强，表明DNA修复能力增强是耐药的重要分子基础。此外由于SNF5缺失可能难以募集XPC从而促进自噬的生物学活性增强从而导致细胞耐药。在临床病理研究中发现SNF5 低表达的膀胱癌患者生存预后显著低于表达阳性的患者，多因素分析提示SNF5是膀胱癌独立的预后因素。本研究的完成对于深入理解膀胱癌的耐药尤其是肿瘤样干细胞耐药的机制具有重要的理论意义，同时也为临床上克服膀胱癌的耐药提供了潜在的新的治疗策略。