人类内源性逆转录病毒基因syncytin与白血病免疫逃逸机制的研究

白血病是严重危害人类生命和健康的10个高发恶性肿瘤之一。研究表明人类内源性病毒基因的异常表达可能是导致肿瘤的重要机制之一。我们在研究中偶然和首次发现人类内源性病毒W家族囊膜蛋白基因syncytin在白血病细胞系以及患者的血细胞中高表达，且表达水平与患者的病情严重程度有关。本研究拟在前期工作基础上，进一步确定syncytin基因是否特异性表达于白血病细胞，通过对高表达FasL的EL4细胞转染syncytin基因以及对表达syncytin基因的白血病细胞系进行RNA干扰等实验手段，观察细胞调亡、增殖活性等生物学特性和免疫抑制相关细胞因子的变化，以及转染syncytin基因的EL4细胞体外致瘤特性的改变，探讨syncytin是否通过影响Fas/FasL途径参与白血病细胞免疫逃逸。研究结果对解释人类内源性逆转录病毒基因参与白血病发病机制，寻找白血病的诊断和药物治疗的新靶点具有重要的意义。

1.白血病是严重危害人类生命和健康的10个高发恶性肿瘤之一。研究表明人类内源性病毒基因的异常表达可能是导致肿瘤的重要机制之一。我们在研究中偶然和首次发现人类内源性病毒W家族囊膜蛋白基因syncytin在白血病细胞系以及患者的血细胞中高表达且表达水平与患者的病情严重程度有关。本研究在前期工作基础上进行了以下研究，研究结果对解释人类内源性逆转录病毒基因参与白血病发病机制具有重要的意义。1.确定syncytin基因表达与白血病患者免疫功能的关系 本研究发现急性B淋巴细胞白血病组中syncytin在白血病细胞上的表达率明显低于急性髓细胞白血病组，但是两组病人粒细胞及淋巴细胞上syncytin表达率非常接近。淋巴细胞上syncytin表达与淋巴细胞CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分比呈负相关，白血病细胞syncytin表达与淋巴细胞CD8+T细胞百分比正相关（r=0.289，P<0.05），淋巴细胞上syncytin表达与淋巴细胞CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分比呈负相关，与机体免疫抑制状态相关。2.Syncytin慢病毒干扰载体及syncytin沉默的Jurkat细胞系的建立 实验通过构建具有syncytin干扰效果的慢病毒载体及其稳定沉默的Jurkat 细胞系证实syncytin过表达后可增强白血病细胞对凋亡的抵抗能力。3、成功构建了表达syncytin基因的真核表达载体并筛选出稳定表达人syncytin的EL4细胞系。4. syncytin基因异常表达与白血病细胞免疫功能的关系Syncytin基因表达稳定下调和过表达的细胞系对细胞生长无明显影响，但细胞外免疫抑制相关细胞因子TGF-β、IL-10、IL-19、IL-35均显著变化，且淋巴细胞上syncytin表达与淋巴细胞CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分比呈负相关，与机体免疫抑制状态相关。5.转染细胞小鼠体内致瘤特性的研究 实验分为对照组、EL4组和低表达组，每组共15只。分别在环磷酰胺化疗后经尾静脉输入2×106相应细胞。骨髓移植后每隔10天进行1次外周血常规检查，2个月后处死小鼠进行常规骨髓细胞学检查，观察白血病发生情况。本实验构建了小鼠白血病模型，但低表达组与EL4细胞组发病情况没有显著性差异，正在调整实验方案，重新验证细胞再次进行致瘤特性研究。