过甲基化MicroRNAs调控内质网应激对胰腺癌转移影响的实验研究

我们前期研究发现：胰腺癌发生转移与其内质网应激微环境密切相关，调控内质网应激相关分子的表达就有可能影响胰腺癌转移；一些与内质网应激相关的MicroRNAs（简称ERM-miRNAs）在胰腺癌中表达因受到过甲基化调控而被抑制，恢复其表达则可调控相关内质网应激分子的表达，进而可能影响肿瘤转移。本课题基于此，研究：①胰腺癌内质网应激微环境下，ERM-miRNAs的甲基化状态与甲基化程度；②通过干预ERM-miRNAs的表达，观察胰腺癌内质网应激微环境特性的变化，以及高淋巴转移潜能胰腺癌细胞对缺氧等内质网应激微环境耐受能力的改变；③利用三维培养技术、体外侵袭实验和胰腺癌转移动物模型，进行体内外实验，观察ERM-miRNAs对胰腺癌细胞转移能力的影响，较全面地认识相关MicroRNAs作为甲基化修饰靶点在调控内质网应激中的作用，并为胰腺癌转移难题的解决提供新的线索。

我们证实：ERS的肿瘤微环境与胰腺癌高侵袭转移特性密切相关；此外，我们还进一步阐明了ERS微环境促进肿瘤侵袭转移的重要调控机制，即：（1）ERS中DNA甲基化使抑癌分子miR-34b表达沉默，继而激活其促癌的靶基因Smad3，促进胰腺癌侵袭转移；（2）ERS中DNA甲基化同时募集了甲基化结合域蛋白MBD1，后者通过促进上皮-间质转化，也导致胰腺癌的高侵袭转移。更为重要的是，我们发现在ERS微环境中， 关键的DNA甲基化转移酶DNMT3a发生显著上调，并对抑癌分子miR-34b 和促癌分子MBD1形成双向调控，是导致胰腺癌高侵袭转移的关键机制。我们的研究结果较圆满的完成了本次青年项目立项的科研要求，丰富了ERS肿瘤微环境促进侵袭转移的理论，为阐明胰腺癌复发转移机制开拓了思路。.本课题相关成果共发表SCI论文5篇，中文权威论文1篇。并申请获得了2014年国家自然科学基金青年-面上连续资助：ERS微环境中DNA甲基化富集内质网分子伴侣GRP78影响胰腺癌侵袭转移的实验研究（81370065）。