新型AAV介导EPO基因修饰的间充质干细胞治疗慢性肾衰竭的基础研究

慢性肾衰竭(CRF)尚无理想的治疗方法。间充质干细胞(MSC)参与肾修复再生和免疫炎症调节;适量促红细胞生成素(EPO)有肾保护和纠正贫血作用,并可增加MSC的活力和功能;腺相关病毒(AAV)安全,但经典单链AAV,甚至双链AAV(scAAV),在小鼠MSC中转导效率低下;对AAV外壳蛋白酪氨酸残基点突变,可获一系列转导效率显著提高的新型AAV。本研究旨在建立新型AAV介导EPO基因修饰的MSC治疗系统，探索干细胞联合基因治疗CRF的新方法。主要研究内容:⑴检测野生型和突变型scAAV载体在小鼠MSC中的转导效率;⑵包装携带EPO基因的野生型和突变型scAAV,用于体外观察不同水平EPO表达对小鼠MSC活性和功能的影响;确定MSC中介导适宜水平EPO表达的突变型AAVx;⑶建立AAVx介导EPO基因修饰的MSC治疗系统，观察其对损伤肾细胞的修复作用以及对CRF小鼠的治疗作用。

慢性肾衰竭（CRF）目前尚无非常有效的防治手段。骨髓间充质干细胞（MSC）可能通过旁分泌微囊泡（MV）及肝细胞生长因子（HGF）机制参与肾修复再生和免疫炎症调节，而适量促红细胞生成素（EPO）有肾保护和纠正贫血作用，并可增加MSC活力和修复功能。本研究联合EPO及 MSC干细胞旁分泌治疗系统，对干细胞治疗CRF的新方法进行了探索。主要研究成果：1. 通过体内外实验探讨MSC的肾损伤修复作用及其旁分泌（如MV、HGF）机制。2. 探讨联合EPO治疗对MSC肾损伤修复作用的影响及其可能机制，观察EPO对MSC的活力、增殖、迁移、分化、旁分泌及肾脏修复功能的影响。本项虽为基础研究，但立足于临床应用，通过MSC联合EPO，在慢性肾衰竭治疗方面取得了一定的突破，为慢性肾衰竭新的治疗途径奠定了基础。