NK4基因修饰间充质干细胞靶向治疗胃癌

我国是胃癌高发区，手术、放化疗等综合性治疗可取得一定疗效，但对多数进展期患者治疗效果不尽人意，有必要探索新的治疗方法。基因治疗是近年肿瘤研究领域热点，目前常用于基因治疗的载体多缺乏靶向性，导致肿瘤组织内的药物浓度不高，难以达到满意疗效。我们前期实验显示，间充质干细胞（MSCs）在体内外对胃癌均具有明显趋向性，在此基础上设想以MSCs为胃癌基因治疗载体靶向治疗胃癌原发及转移病灶。本研究选择具有抑制肿瘤细胞侵袭转移及肿瘤血管形成的NK4基因为目的基因，通过慢病毒介导NK4基因转染MSCs，体外观察Lenti-NK4-MSCs对胃癌细胞生长增殖影响；将Lenti-NK4-MSCs注入胃癌皮下移植瘤及原位移植高转移裸鼠体内，观察其在体内对胃癌生长、侵袭、转移及对荷瘤鼠生存期的影响，评价其安全性，研究结果可望为胃癌靶向基因治疗提供新思路，为NK4基因治疗应用于临床改善进展期胃癌患者预后奠定基础。

本项目按计划进行，主要进行了以下研究：.1、.采用全骨髓培养法分离培养鉴定出间充质干细胞，提示采用全骨髓培养法可分离培养获得高纯度的MSCs，且随着传代纯度不断提高，自第3代起纯度明显增加，第三代至第六代可用于实验研究。构建表达NK4基因的慢病毒表达载体，并获得高滴度的重组慢病毒（Lenti-NK4）；.2、.研究了慢病毒转染对MSCs 干细胞特性及生长增殖的影响以及NK4-MSCs对胃癌细胞生长增殖的影响，结果显示携带NK4的慢病毒能安全、有效地转染MSCs，转染后NK4基因可持续稳定表达；NK4可促进胃癌细胞凋亡。.3、.采用Transwell共培养体系以及裸鼠胃癌皮下移植瘤模型研究MSCs对胃癌细胞体内外趋向性，结果显示MSCs在体内外对胃癌均有明显趋向性，安全性好，可成为胃癌基因治疗的优势载体。.4、.建立胃癌肝转移模型，研究MSCs为载体的NK4基因治疗对胃癌治疗效果、安全性及其机制，结果显示MSCs为载体的NK4基因治疗抑制肿瘤血管形成及诱导肿瘤细胞凋亡，使肿瘤组织坏死增加，从而抑制胃癌皮下移植瘤及肝转移瘤的生长。.以上结果为以MSCs为载体的胃癌靶向基因治疗提供了依据，为NK4基因治疗胃癌应用于临床奠定了基础，相关研究结果发表中文核心期刊3篇，目前已被引用多次。