足细胞与肾小管上皮细胞共同损伤的分子机制研究

局灶节段性肾小球硬化(FSGS)以足细胞损伤为突出特点，但肾小管上皮细胞损伤在这类患者很常见，而且蛋白尿程度不足以解释其原因。研究显示，FSGS患者Th2细胞异常活化与足细胞损伤和蛋白尿产生有关。Th2细胞因子IL-13可以通过足细胞上的IL-13受体(IL-13R)，导致足细胞损伤。由于足细胞和肾小管上皮细胞分享许多共同的分子，因此我们推测，这可能是导致FSGS状态下足细胞和肾小管上皮细胞同时损伤的分子基础。本研究从体内、体外两个方面展开，体内利用人肾活检组织观察肾小管上皮细胞IL-13R表达、FSGS患者肾小管上皮细胞IL-13R表达变化与小管间质损伤和病理类型的关系；通过体外培养人肾小管上皮细胞观察IL-13R表达，IL-13对肾小管上皮细胞的损伤作用及其信号通路。该研究对阐明FSGS患者足细胞和肾小管上皮细胞同时损伤的分子机制具有重要价值，并对此类患者治疗理念更新具有重要的启示。

局灶节段性肾小球硬化（Focal segmental glomerulosclerosis, FSGS）以足细胞损伤为突出特点，但肾小管上皮细胞损伤在这类患者很常见。IL-13通过与足细胞膜上的IL-13R结合导致足细胞损伤。由于足细胞和肾小管上皮细胞发育上的共同起源和众多分子的共享，我们推测，IL-13R可能是导致FSGS足细胞和肾小管上皮细胞共同损伤的分子基础。结果显示， FSGS患者近端肾小管上皮细胞IL-13R表达明显高于正常对照和疾病对照。并且发现小管间质急性损伤的患者小管IL-13R表达明显高于小管间质慢性损伤患者。我们还发现IL-13R表达增加的肾小管趋化因子RANTES表达增强，同时小管上皮细胞极性消失。体外实验发现经IL-13刺激的HK2细胞 STAT6发生磷酸化。HK2细胞过表达IL-13Ra1后，其相关的信号通路STAT6磷酸化，细胞发生损伤甚至凋亡，并且出现RANTES表达。因此，本研究证实小管IL-13R表达增加见于伴有急性小管损伤的FSGS患者。STAT6信号通路介导IL-13R对肾小管上皮细胞的损伤作用。本研究为FSGS患者足细胞与肾小管上皮细胞共同损伤提供了分子基础。. 但仅从单一某个分子的角度来研究难以全面揭示足细胞和肾小管上皮细胞共同损伤的分子机制。因此本研究利用mRNA和miRNA芯片筛选损伤刺激后足细胞和肾小管上皮细胞表达共同变化的mRNA和miRNA，以期进一步深入探讨两者共同损伤的分子机制。结果显示，1. LPS刺激足细胞和肾小管上皮细胞后共同表达变化的mRNA有1378个。从中分析得到共同参与的251个信号通路，发现相当部分为免疫相关信号通路。我们最终选择CD40、TRAF3IP2、PLAUR作为足细胞和肾小管上皮细胞共同损伤的候选分子。2. LPS刺激足细胞和肾小管上皮细胞共同表达变化的miRNA有79个。我们从中筛选出8个miRNA作为足细胞和肾小管上皮细胞共同损伤的候选分子。经qPCR验证其中miR-23a、miR-29b、miR-30e表达与芯片结果相一致，均呈下降趋势。进一步利用原位杂交探针对FSGS患者组织切片进行染色，发现miR-29b和miR-30e在足细胞和肾小管上皮细胞表达均减少。. 待动物模型和临床FSGS患者进一步验证候选分子及其导致足细胞和肾小管上皮细胞损伤机制的研究。