利用糖链转移酶Endo-M建立N-连接糖链高灵敏分析方法

糖蛋白糖链具有广泛的生理和病理作用。N-连接糖链对细胞癌症的发生和转移、以及造血功能有密切关系，因而需要解析其化学结构，以便进一步研究结构与功能的关系。研究糖蛋白糖链的传统方法一般是将糖链切掉并分离纯化后进行分析。在本项目中，我们着眼糖链转移酶Endo-M[切断N-连接糖链五糖核心最内侧的两个N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc-GlcNAc）之间的糖苷键，将其中一个GlcNAc 留在多肽链上，并把释放出来的糖链转移到另外一个含有GlcNAc残基的受体]的特异性，合成能大大提高质谱的检测灵敏度和可提高糖链转移率的受体，借助Endo-M酶反应，一步完成N-连接糖链的酶切和被释放糖链与受体的衍生化反应，然后，采用色质联用技术，将建立简便、高灵敏、高选择性的N-连接糖链分析方法，为N-连接糖链生物功能的深入研究提供有效、可靠的分析检测手段和相关研究试剂。