甘草次酸对豚鼠鼻粘膜纤毛上皮细胞生理功能调节机制研究

中医药学认为甘草具有补脾益气、清热解毒、润肺止咳、调和诸药之功能，应用范围十分广泛。现代医药证明，甘草的主要有效成分甘草甜索在人体内经胃酸水解为甘草次酸后经由小肠吸收进入血液而发挥药效。甘草次酸与氢化可的松的结构相似，因而表现出明显的类激素样作用，能调节T细胞释放细胞因子，使Th1/h2保持平衡等抗过敏效果。而慢性鼻-鼻窦炎是由于炎症刺激后引起的变态反应。虽然甘草在慢性鼻-鼻窦炎方剂中都有入药，但其对鼻腔- - 鼻窦黏膜上皮细胞功能的具体影响在国内外尚未见相关研究。本课题分别通过甘草次酸对健康豚鼠鼻粘膜结构和功能的影响、对健康豚鼠鼻粘膜细胞毒性反应及对变应性鼻炎豚鼠鼻粘膜的影响三个方面从组织病理、超微结构、免疫组化、流式细胞等多方面观察，研究甘草次酸对豚鼠鼻粘膜纤毛上皮细胞生理功能调节机制。以期发挥祖国传统医药之优势，挖掘出毒副作用小、效果佳的治疗慢性炎症性鼻病的中药制剂。

背景：甘草的主要有效成分甘草次酸与氢化可的松的结构相似，因而表现出明显的类激素样作用，能调节T细胞释放细胞因子，使Th1/h2保持平衡等抗过敏效果。本课题分别通过18β-甘草次酸(18β-GA)对大鼠重要器官的毒性及对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜从组织病理、超微结构、免疫及水代谢等多方面观察，研究18β-GA的毒性及对大鼠鼻粘膜纤毛上皮细胞生理功能调节机制。.主要研究内容：.1.局部影响：分别从两种途径（滴鼻/口服）和三大内容（超微结构、水代谢、免疫）观察.1.1 18β-GA口服及滴鼻对AR大鼠鼻黏膜纤毛上皮超微结构的影响（纤毛超微结构、线粒体、内质网、紧密连接）.1.2 18β-GA口及滴鼻服对AR大鼠鼻黏膜水通道蛋白（1、3、5）的影响.1.3 18β-GA口服及滴鼻对AR大鼠鼻黏膜免疫功能的影响.Th1/Th2细胞、嗜酸粒细胞及Eotaxin基因、血清中IL-4、IL-5、γ－干扰素等。.2.对主要相关脏器的影响（肝、肾、血细胞、血糖及血脂的影响）.重要结果、关键数据： 18β-GA的干预可使AR大鼠鼻黏膜假复层纤毛柱状上皮粘连、倒伏的纤毛逐渐恢复为整齐密集状；可使线粒体数量增多、体嵴消失、肿胀、空泡化等现象好转；可使细胞间紧密连接长度变短、融合点数量减少、间隙增宽甚至断裂的现象缓解；可使内质网增多，囊样扩张及脱颗粒的损害消失；可使AR大鼠鼻黏膜中增强的嗜酸粒细胞趋化因子-1、水通道蛋白1和嗜酸粒细胞浸润（P＜0.05）在各检测时间点上均显示下降（P＜0.05）；RT-PCR检测水通道蛋白3 在mRNA水平的表达明显上升（P < 0.05），免疫印迹检测水通道蛋白3在蛋白质水平的表达上升（P < 0.01）；药物毒性试验显示长期服用对健康大鼠肝、肾形态及各主要指标均无明显影响，有降低血糖的趋势，可引起一过性的RBC、HGB、MCHC、N%、PLT的升高和MCV、L%的降低，这种影响在停药一定时间后消除。.科学意义：18β-GA可通过延缓或逆转AR大鼠鼻黏膜纤毛、线粒体、内质网及细胞间紧密连接的病理改变，可抑制鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子-1、水通道蛋白1和嗜酸粒细胞浸润程度、下调水通道蛋白1,5的表达、提高鼻黏膜中水通道蛋白3的表达抑制过敏性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮损害及水肿等病理改变达到治疗过敏性鼻炎的作用。