自噬在人涎腺腺样囊性癌应激生存及化疗耐受中的分子机制

最新研究表明自噬是肿瘤细胞存活的一条重要途径。结合我们的前期研究，本课题推测"mTOR信号通路介导的自噬在人涎腺腺样囊性癌 (ACC) 应激生存及化疗耐受过程中起重要调控作用"。并拟从以下几个方面展开研究：①检测ACC组织中自噬、生存相关基因及蛋白表达水平，mTOR信号通路活化程度，明确其与化疗应激的相关性；②以ACC细胞系为研究对象，免疫双标技术体外、体内观察顺铂及西妥昔单抗处理后细胞自噬、凋亡及生存的变化，芯片技术检测自噬和生存相关基因及mTOR相关信号分子的改变；③ 进一步应用RNAi技术沉默ACC细胞中mTOR基因联合应用自噬抑制剂或自噬诱导剂预处理ACC细胞，研究顺铂及西妥昔单抗处理对细胞自噬、凋亡、生存及相关基因表达的影响。明确mTOR信号通路介导的自噬在应激生存及化疗耐受中的调控作用，将进一步阐明人涎腺腺样囊性癌恶性发展及化疗抵抗机制，为治疗腺样囊性癌的新药开发提供新思路。

本研究利用人涎腺腺样囊性癌（ACC）组织及ACC-2细胞系及作为研究模型，探讨了人涎腺腺样囊性癌组织中的自噬相关基因的表达和分子调控机制。首先建立ACC组织芯片，免疫组织化学实验结果表明：在人涎腺腺样囊性癌组织中自噬相关基因LC3，Beclin1, LAMP2的表达以及与mTOR复合体1（通过磷酸化S6S235/236免疫组织化学检测）较正常涎腺明显上调，其表达与HIF1α,Survivin，TFEB及TFE3具有相关性；体外及体内抑制mTOR及survivin显著增加ACC自噬，抑制自噬可以增加ACC的凋亡。此研究结果提示ACC中自噬表达可能与Akt/mTOR通路活化相关。化疗诱导ACC自噬是ACC抵抗化疗的重要途径。Akt/mTOR/HIF1α/survivin/TFEB/TFE3通路可能是调控ACC自噬的的关键信号通路。通过本项目的研究工作,我们建成了多项技术平台,如:ACC组织芯片及分析系统， 哺乳动物自噬的检测，转基因动物临床前治疗模型等。目前多项研究成果已发表于国际权威杂志Apoptosis,共发表SCI论文12篇(含接受,均标注资助)，后期数据仍在整理待发表中。