Nrp2/GIPC1信号轴在人涎腺腺样囊性癌血管生成中作用机制的研究

新近研究发现，神经轴突引导分子Neuropilin-2（Nrp2）可对肿瘤血管生成起到重要的调控作用；而作为膜蛋白，Nrp2蛋白的胞内段PDZ 结合位点与GIPC1蛋白结合参与调控整合素蛋白在胞内的运输及激活；同时我们的前期研究发现Nrp2蛋白高表达于人腺样囊性癌组织及细胞系中而不表达于正常的涎腺上皮组织，并且其在肿瘤组织中的表达与瘤体内的微血管密度呈明显的正相关。综合已有研究结果，我们推测：Nrp2可能通过GIPC1蛋白影响SACC肿瘤血管生成。本研究拟探讨以下几方面内容：①通过RNAi干扰技术抑制SACC细胞中Nrp2的表达，检测Nrp2对SACCs肿瘤血管生成的作用；②用pulldown技术、激光共聚焦显微镜技术检测在SACCs中Nrp2与GIPC1的作用；③用蛋白芯片技术筛选Nrp2的下游靶基因。有望揭示Nrp2对SACCs肿瘤血管生成的作用及机制，为腺样囊性癌治疗提供新的思路。

背景：人涎腺腺样囊性癌（Salivary adeniod cystic carcinoma，SACCs）是一种恶性涎腺上皮性肿瘤，是口腔颌面部最具特色的恶性肿瘤之一，好发于腮腺、颌下腺及小涎腺，其突出的临床病理特点是肿瘤易发生神经浸润性生长、局部复发率较高及早期可发生血行转移等。目前对腺样囊性癌的化疗治疗效果差，肿瘤细胞易产生耐药性，并且全身毒副作用大；对c-KIT、表皮生长因子受体（EGFR）、孕酮受体及雌激素受体等的肿瘤分子靶向药物治疗均未取得很好的治疗效果。因此，进一步明确腺样囊性癌发生发展中的分子机制，可为分子靶向治疗提供新的行之有效的靶点及新药开发提供新的思路。目前众多的关于影响人涎腺腺样囊性癌预后的相关因素的研究公认：瘤体内的微血管发生是影响其预后的重要因素之一，因此进一步明确肿瘤血管生成的调控机制，可为腺样囊性癌治疗提供新的思路。Neuropilin-2是新发现的VEGF受体，在众多肿瘤中高表达，并且我们前期研究发现Nrp2高表达于SACC组织中；.方向：研究Nrp2/GIPC1信号轴在SACC血管生成中的作用及机制；.研究内容：首先，研究Nrp2在SACC组织和细胞系中的表达情况，及其与微血管密度的关系；其次，构建Nrp2 RNA干扰慢病毒载体抑制SACC-LM细胞Nrp2的表达，检测抑制Nrp2表达后SACC-LM在体内及体外诱导血管生成的作用；再次，探讨Nrp2影响SACC-LM血管生成的机制；最后，回到组织中检测Nrp2、GIPC1及FAK表达的相关性；.结果：1、Nrp2在SACC组织中高表达，而在瘤体周围的正常组织中不表达，并且Nrp2的表达与组织中的MVD呈正相关（P < 0.01）。在SACC细胞系中， Nrp2在高转移株SACC-LM的表达明显高于低转移株SACC-83（P < 0.01）；.2、抑制Nrp2在SACC-LM中的表达同时在体内及体外抑制SACC细胞诱导的血管生成.3、激光共聚焦显微镜与Westernblot结果显示Nrp2是通过与GIPC1相互作用促进整合素-FAK-AKT信号激活，进而促进肿瘤诱导的血管生成；.4、Nrp2、GIPC1及FAK激酶在SACC组织中表达均呈正相关，且均与MVD呈正相关。.结论：Nrp2/GIPC1信号轴是通过促进整合素-FAK-AKT信号激活，来调控SACC血管生成的。