小麦清球蛋白品质相关亚基的蛋白质组学鉴定及其分子遗传研究

利用蛋白质组技术鉴定小麦胚乳清蛋白和球蛋白中与品质相关的候选蛋白（包括优质和劣质亚基以及引起过敏反应导致某些疾病的亚基），并克隆其编码基因。首先采用差异荧光双向凝胶电泳（DIGE）并结合高效毛细管电泳（HPCE）、反相高效液相色谱（RP-HPLC）和快速蛋白质层析系统（FPLC）等蛋白质组方法，鉴定清蛋白和球蛋白中与品质相关的候选蛋白亚基，然后利用MALDI-TOF-MS、MAIDI-MS/MS和RP-HPLC-ESI-MS/MS等生物质谱技术对这些蛋白进行进一步的鉴定，获取候选蛋白的结构信息，同时进行相应蛋白亚基的回收纯化、转膜与N-端氨基酸微量测序。在此基础上根据蛋白保守序列设计AS-PCR引物，扩增、克隆其编码基因,测序后分析不同候选基因序列结构特征，并通过基因表达和品质微量检测进一步验证其功能特性。本研究对明确清球蛋白在小麦品质改良中的作用、进一步丰富候选优质基因资源具有重要意义。