Tim-3调控巨噬细胞活化在糖尿病肾病免疫损伤中的作用及机制研究

Diabetic nephropathy (DN) is a serious complication of diabetes, and is also considered as the main reason leading to end stage renal disease, disability and even death. Numerous studies have indicated that the progress of DN is correlated with inflammation, especially with the activation of macrophages in kidney. T cell immunoglobulin and mucin domain-3 (Tim-3) is an important immune regulator involving in various types of immune diseases. Besides, Tim-3 is highly expressed on macrophages. Our previous data obtained from DN mice models or DN patients suggests that the expression of Tim-3 is up-regulated on macrophages, especially on type 1 macrophages. Moreover, Tim-3 has been proved to regulate macrophage polarization in tumor condition. Thus, we hypothesize that Tim-3 may be involved in the development of DN by regulating renal macrophage activation. The sthdy intents to explore the roles and mechanisms of Tim-3 regulating macrophage activation in different DN models including diabetic mice, cell lines and patients. Tim-3 blocking antibodies and Tim-3 siRNA will be used to verify the role of Tim-3 on macrophages. This study may provide novel information on the pathogenesis and therapy of DN.

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病的常见重要并发症，也是糖尿病致死、致残及终末期肾病的主要原因。众多研究表明其发生发展与免疫炎症，尤其是与巨噬细胞活化的关系重大。新型免疫调节分子Tim-3参与多种免疫性疾病的发生，并高表达于巨噬细胞。我们前期研究结果发现DN患者及DN小鼠模型中单核巨噬细胞Tim-3表达明显升高，且M1型巨噬细胞中Tim-3的表达明显上调，而其他免疫细胞Tim-3表达无明显差异。据此，我们提出假设：Tim-3可能通过调控巨噬细胞活化，介导肾组织免疫损伤，参与DN发生发展。本研究拟以细胞模型、动物模型及临床标本，利用流式、抗体阻断和shRNA等多种方法研究Tim-3调控巨噬细胞活化在DN免疫损伤中的作用及机制，为揭示DN的发病机制提供新的思路，同时也为探索DN新型治疗方案奠定基础。

糖尿病肾病 (diabetic nephropathy, DN) 是糖尿病 (diabetes mellitus, DM) 主要的微血管并发症，是导致终末期肾病的主要病因之一。众多研究表明其发生发展与免疫炎症，尤其是与巨噬细胞活化的关系重大(密切？)。目前，DN与免疫炎症反应的研究中存在三大科学难题：1. DN免疫发病机制不明；2. DN相关免疫调节因子不详3. DN免疫干预靶点甚少。因此，亟需明确免疫炎症反应在DN发病机制中的作用，寻找与DN相关的新型免疫调节因子，并阐明其分子生物学机制。Tim-3通过调节免疫反应参与多种疾病进展，但其在DN中的作用尚未阐明。本研究中，项目负责人利用体内外实验及临床标本验证，系统研究Tim-3在DN足细胞损伤中的作用及分子机制。具体结果如下：首先，本研究首次发现Tim-3在DN肾组织巨噬细胞中表达显著上调，敲减、敲除肾脏Tim-3能够缓解DN病小鼠足细胞损伤，减少尿蛋白水平。其次，Tim-3在多种免疫相关慢性肾脏疾病患者肾脏中表达上升，并且Tim-3表达量与DN患者肾小球滤过率呈负相关、与尿白蛋白水平呈正相关。此外，Tim-3通过激活肾脏巨噬细胞中NF-κB/TNF-α信号通路诱导巨噬细胞活化，加剧肾小球足细胞凋亡、足细胞纤维骨架损伤，增加尿蛋白的排泄。本研究通过深入研究Tim-3在DN中的表达、调控及其机制，阐明Tim-3可能是参与DN发生发展的重要分子，为DN免疫分子靶向治疗提供新的实验数据与理论依据。项目负责人长期从事Tim-3与肾病研究，工作基础良好。课题着眼于具有免疫调节功能的新型分子Tim-3研究DN的发生机制，创新性明显，具有重要理论意义与潜在应用价值。本项目荣获山东省自然科学二等奖1项、山东省医学科技奖-科技创新成果二等奖1项，共发表SCI论文4篇，北大核心期刊A类1篇、B类1篇，培养青年医师2人，青年教师1人，博士研究生1人，硕士研究生6人，研究成果多次在国内外会议中行口头汇报、壁报交流。