δ阿片受体对吗啡复吸大鼠前额叶皮层和海马区兴奋性氨基酸转运蛋白的作用研究

Increasing data suggest that the expression and function of excitatory amino acid transporters (EAATs) in neurons and astrocytes decreased significantly in the relapse of morphine addiction. But the mechanisms of alterations of EAATs remain unknown. δ receptor plays an important role in the development of relapse of morphine addiction, usually acting as μ-δ heteromeric receptors rather than homomeric receptors. Our previous experiments found that the protein and mRNA expression of excitatory amino acid transporter 3 (EAAT3) in the primary hippocampal neurons decreased significantly after chronic expoure to morphine or δ receptor selective agonist DPDPE, while δ receptor selective inhibitor naltrindole weakened the decreased EAAT3 expression caused by chronic morphine exposure.Thus,we speculate that morphine addiction and relapse decreased EAATs expression or function through the activation of δ receptor. On the basis of our previous experiments, we will do in-depth study both in vitro and in vivo in the role of δ opioid receptor on hippocampal and frontal cortical EAATs in the relapse of morphine addition, and clarify wherthe δ receptor works in the form of μ-δ heteromeric receptors during this process.Our research could provide new the theoretical and experimental proofs for prevention and cure of morphine relapse.

神经元和胶质细胞上兴奋性氨基酸转运蛋白（excitatory amino acid transporters, EAATs）的表达或功能下降与吗啡成瘾复吸行为密切相关。但目前关于慢性吗啡暴露引起EAATs表达或功能下降的机制尚不完全清楚。δ受体是参与吗啡成瘾复吸发生发展的重要阿片受体，通常与μ受体形成μ-δ异源二聚体而发挥作用。我们前期研究发现吗啡和δ受体激动剂均降低了原代海马神经元EAAT3蛋白和mRNA的表达，而δ受体抑制剂则减弱慢性吗啡处理引起的EAAT3蛋白和mRNA表达下降。因此我们提出科学假设：吗啡通过激活δ受体引起的EAATs表达或功能下降从而导致成瘾复吸行为。本课题拟在前期研究的基础上体内外研究相结合阐明δ受体在吗啡复吸大鼠前额叶皮层和海马区EAATs表达或功能下降中的作用，并阐明这个过程中δ受体是否以μ-δ异源二聚体的形式发挥作用，从而为防治吗啡成瘾复吸提供可能的实验依据。

神经元和胶质细胞上兴奋性氨基酸转运蛋白（excitatory amino acid transporters, EAATs）的表达或功能下降与吗啡成瘾复吸行为密切相关。但目前关于慢性吗啡暴露引起EAATs表达或功能下降的机制尚不完全清楚。δ受体（DOR）是参与吗啡成瘾复吸发生发展的重要阿片受体，通常与μ受体（MOR）形成μ-δ异源二聚体而发挥作用。前期研究发现吗啡和DOR激动剂均降低了原代海马神经元EAAT3蛋白和mRNA的表达，而DOR抑制剂则减弱慢性吗啡处理引起的EAAT3蛋白和mRNA表达下降。因此我们提出科学假设：吗啡通过激活DOR引起的EAATs表达或功能下降从而导致成瘾复吸行为。后续研究发现改变MOR活性对慢性吗啡暴露中海马神经元细胞EAAT3的调节作用与前期实验相似，动物试验中抑制DOR的激活可抑制吗啡介导的EAAT3表达下降，且选择性DOR抑制剂Nartrindole仅部分减弱CPP复燃实验，推测DOR、MOR均参与到吗啡复吸的形成，且可能是以μ-δ异源二聚体的形式发挥作用。此外，在探索吗啡成瘾其他可能机制的过程中，我们建立了吗啡成瘾大鼠模型，并发现其NAc壳区中星形胶质细胞上的Cx43及GFAP表达增加，EAAT2的表达下降，而神经元细胞上NR1/p-NR1及NR2B/p-NR2B的表达增加。使用Gap27选择性阻断NAc壳区Cx43形成GJ，可下调GFAP表达，增加EAAT2表达，降低NR1/p-NR1及NR2B/p-NR2B的表达，并明显改善吗啡成瘾大鼠的戒断症状，提示Cx43可能是通过增加表达并形成GJ参与调节吗啡成瘾。以上研究，有利于进一步研究阿片类药物成瘾复吸的分子机制，寻找新的治疗靶点及确立更加安全有效的治疗方法。