复方中药宁心红杞胶囊抑制卵巢颗粒细胞凋亡活性成分研究

卵巢衰老可引起机体内分泌失调，造成不孕症、围绝经期综合症、骨质疏松等各种疾病，严重影响妇女生活质量。国内外对于卵巢功能衰退的发病原因和机理的研究一致认为，颗粒细胞（GC）的凋亡是造成卵泡闭锁和分泌功能下降的重要原因。本研究采用卵巢颗粒细胞体外筛选模型及酵母双杂交-雌激素受体联用技术，对一个临床验证有明显疗效，动物实验证明能有效抑制卵巢颗粒细胞凋亡、延缓卵巢衰老的复方中药，进行成分分离和活性筛选，考察颗粒细胞的：增殖率变化、形态衰老特征变化（光镜、电镜）；合成激素能力的变化等多重指标，探求复方中各个成分在影响颗粒细胞凋亡时的作用靶点和可能的干预环节，揭示多种活性成分在抑制颗粒细胞凋亡、促进激素分泌能力提高等方面的各自贡献和配伍作用。本项目利用卵巢颗粒细胞体外模型，创新性地使用酵母双杂交-雌激素受体和多重指标筛选活性成分，力求重现复方中药的多途径、多层面的作用机制，为卵巢活性药物研发奠定基础。

本研究通过植物化学和药理学相结合的方法，对宁心红杞胶囊复方的活性部位进行了提取分离纯化，并通过体外颗粒细胞筛选平台进行了活性筛选，对其活性部位进行了来源归属分析和成分分析，确立单体Z、T总黄酮和G多糖能促进离体卵巢颗粒细胞增殖并增加雌孕激素分泌能力，活性较好。然后富集各活性部位以14月龄自然衰老大鼠为模型，灌胃30天，以血清中雌孕激素，卵巢、子宫、肾上腺、垂体的脏器系数，颗粒细胞凋亡百分率，透射电镜观察卵泡的结构为指标，结果显示，单体Z、T总黄酮、G多糖都显著改善卵巢的结构，提高雌孕激素水平，降低颗粒细胞凋亡率，延缓卵巢衰老，从多方面、多层次、多角度探讨了宁心红杞胶囊对大鼠卵巢的影响。