以EB病毒LMP1信号途径为核心的蛋白质分子网络研究

EB病毒潜伏性膜蛋白1（LMP1）作为病毒唯一的瘤蛋白能活化多条信号通路而导致细胞的恶性转化，但涉及一些复杂而精细的信号网络机制尚不十分清楚.本研究一方面将构建的CTAR1,CTAR2,CTAR3 3个功能区突变的LMP1与野生型LMP1分别导入永生化的鼻咽上皮细胞（NP69），建立稳定表达并具有表型改变的各转化细胞系，采用双向凝胶技术结合质谱和生物信息学技术分离和识别LMP1各功能区所介导的蛋白信号分子及分子间的相互作用；另一方面将磷酸酶抑制剂Calyculin处理的野生型LMP1(含对照)即时转染的NP69细胞采用磷酸化蛋白质富集（免疫沉淀）结合SDS-PAGE和质谱技术分离和识别LMP1介导发生丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化的蛋白质种类及信号途径。不仅能首次从蛋白质水平全方位展示LMP1作用的靶蛋白，而且为进一步阐述LMP1在细胞信号传导中的作用和机制提供新的、更完整的证据。