氢气选择性抗氧化并调节Nrf2信号转导通路抑制ROS诱导的噪声性听觉损伤的实验研究

噪声性聋已经成为现代工业和军事领域中的突出问题，ROS增加是其主要致病因素，目前缺乏理想的治疗手段。根据氢气的选择性抗氧化及易渗透、无毒、无残留等特点，文献和我们前期研究都证实氢盐水可以显著减轻噪声引起的耳蜗毛细胞损伤，但机制不明确。我们的预实验显示氢气可以进入耳蜗内，同时上调内源性抗氧化关键转录因子Nrf2在声损伤耳蜗组织中的表达。本课题在以往相关研究基础上，利用RT-PCR、Western-blot、EMSA、HPLC等分子生物学技术并联合应用Nrf2基因敲除小鼠模型，研究：①明确耳蜗内氢气含量变化与抑制噪声性耳蜗损伤作用的量效关系；②确定氢气对耳蜗内毒性强的ROS具有选择性清除作用；③证实氢气具有上调Nrf2及其信号转导通路的作用；④证实Nrf2基因敲除后氢气的抗氧化效应降低或消失。上述研究力图阐明氢气在耳蜗内的选择性抗氧化作用并调节耳蜗内源性抗氧化机制，为噪声性聋的治疗开辟新途径。

噪声性聋已经成为现代工业和军事领域中的突出问题，ROS增加是其主要致病因素，目前缺乏理想的治疗手段。.本项目在以往相关研究基础上，根据氢气的选择性抗氧化及易渗透、无毒、无残留等特点，通过听觉脑干反应(ABR)和畸变产物耳声发射(DPOAE) 评估听力阈值和外毛细胞功能；通过徕卡(DM2700)LSM共聚焦显微镜和图像处理系统评价噪声暴露后耳蜗外毛细胞损伤；利用RT-PCR、Western-blot、Simple Western Analysis等分子生物学技术并联合应用Nrf2基因敲除小鼠模型，对氢气选择性抗氧化并调节Nrf2信号转导通路抑制ROS诱导的噪声性听觉损伤的机制进行了深入研究，同时对相关的临床治疗进行了必要的探索。.研究结果表明：（1）明确富氢盐水腹腔注射可以显著减轻噪声对豚鼠耳蜗结构和功能损伤；（2）大鼠强噪声损伤后，耳蜗内Nrf2基因表达和蛋白含量升高，Nrf2/Keapl-ARE信号通路下游抗氧化酶SOD1、HO-1基因表达和蛋白含量也随即上调，可能对噪声引起的耳蜗内氧化应激损伤具有一定的保护作用；（3）富氢盐水腹腔注射后能够清除自由基、提高抗氧化酶活性，减轻氧化应激反应引起的耳蜗损伤，对噪声性聋具有干预保护作用。（4）富氢盐水通过上调噪声导致的Nrf2 / HO-1通路清除噪声暴露后耳蜗内堆积的毒性自由基减轻大鼠噪声性聋；（5）证实Nrf2基因敲除后氢气的抗氧化效应降低甚至消失；（6）早期经鼓室注射类固醇激素对延期治疗的噪声性聋疗效较常规的类固醇激素治疗更明显。（7）早期经激光鼓膜穿孔鼓室内应用甲强龙治疗“不良预后”突发性聋可获得较常规激素治疗更好的疗效。.本项目研究已发表SCI论著2篇（IF分别为3.38、2.465）、中文核心期刊论著2篇、已投稿SCI论著2篇、正在总结和论文书写SCI论著1篇。培养研究生（本人为导师）3名，其中2名已经顺利毕业。