DJ-1蛋白在人脑胶质瘤细胞去分化中的分子调控机制

已知DJ-1是多种肿瘤中呈高表达的癌基因，但其在人脑胶质瘤的研究甚少。我们前期的研究工作发现DJ-1在脑胶质瘤细胞系中表达明显上调，其表达水平与胶质瘤分化水平相关；同时，高表达DJ-1可抑制PTEN表达，促进Wnt通路中的β-catenin蛋白在核聚集，诱导肿瘤细胞去分化。DJ-1在肿瘤细胞分化和去分化的过程中扮演着怎样的角色？有必要进一步通过体内体外的研究方法相互结合以解构肿瘤分化、去分化的本质，分析DJ-1、PTEN、β-catenin等分化相关蛋白与胶质瘤的分级、TMN分期及临床预后判断的相关性，为阐明DJ-1在胶质瘤去分化过程中的分子调控机制提供新的内涵。

人脑胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤，约占全部颅内肿瘤的40%-50%。研究胶质瘤细胞分化及其迁移侵袭的分子机制，不仅有助于阐明胶质瘤的发生机制，还有助于寻找和鉴定具有诊断和治疗价值的胶质瘤细胞分子标志物。本实验室前期研究中从胶质瘤细胞系SWO38中克隆出两株不同分化水平的胶质瘤细胞亚系SWO-Z1与SWO-Z2，SWO-Z1细胞分化程度较低，SWO-Z2细胞分化程度较高，为本课题深入研究胶质瘤分化特异性分子标志物的筛选提供了重要的研究材料。本研究旨在探讨DJ-1基因在胶质瘤去分化及迁移侵袭中的作用，并研究其作用机制，为寻找和鉴定具有诊断和治疗价值的胶质瘤细胞分子标志物，为分化诱导治疗以及正在进行临床研究的基因治疗提供新的治疗靶点。本研究发现：1）DJ-1在SWO-38中表达量最高，在分化程度最低的SWO-Z1中表达量最低。β-catenin蛋白表达量在三株细胞中的变化趋势与DJ-1基本一致。PTEN表达量在三株细胞中变化不明显。2）si DJ-1转染SWO-38细胞24h，DJ-1、PTEN与β-catenin蛋白表达量改变，si DJ-1有效下调SWO-38细胞中DJ-1表达，并影响β-catenin蛋白的表达，使其出现明显下降。3）DJ-1在83例不同级别的胶质瘤组织中的表达经统计学分析，胶质瘤各分级之间DJ-1的表达量有显著差异(P<0.01)，且随着胶质瘤恶性程度的增加，DJ-1在细胞浆内的表达量也随着增加。4）过表达及下调SWO-38细胞的DJ-1表达，影响胶质瘤细胞的迁移侵袭。经过转染，SWO38细胞DJ-1的表达水平升高，PTEN的表达水平下降，FAK磷酸化水平升高; SWO-38细胞转染si DJ-1后，DJ-1表达水平下降，PTEN表达水平升高，p-FAK的水平降低。体外迁移与侵袭实验发现，转染pEGFP/DJ-1促进SWO-38细胞的迁移和侵袭，与对照组相比较，差异有统计学意义 (P<0.05)。转染si DJ-1抑制SWO-38细胞的迁移和侵袭，与对照组相比较，差异有统计学意义 (P<0.05)。5）EGCG下调DJ-1的表达抑制SWO-38细胞的迁移和侵袭。我们的研究结果提示DJ-1参与调节胶质瘤细胞的去分化，并且EGCG抑制SWO-38迁移侵袭的机制可能与EGCG抑制DJ-1的表达而降低FAK的磷酸化(p-FAK)水平相关。