双生病毒新型卫星DNA分子的复制机理研究

双生病毒是世界范围内广泛发生的一类植物单链DNA病毒，已引起多种作物的严重病害。与此类病毒致病性紧密相关的新型卫星DNA（DNAβ）依赖病毒DNA-A进行复制，但其机制还不清楚。本项目利用中国番茄黄化曲叶病毒（TYLCCNV）和烟草曲茎病毒（TCSV）的复制相关蛋白（Rep），在体外鉴定Rep蛋白结合DNAβ分子的位点和介导结合的蛋白结构域，分析Rep蛋白结合DNAβ的专化性和效率对病毒致病性的影响；在体内利用TYLCCNV和TCSV DNA-A和DNAβ的侵染性克隆验证体外试验的结果并分析Rep蛋白结合位点突变对病毒复制和致病性的影响，揭示DNAβ分子复制的机制及对病毒致病性的影响。项目的完成可望较全面的反映DNAβ复制的分子机理，为双生病毒DNA-A和DNAβ互作研究提供理论基础。同时，对于弄清双生病毒严重危害的分子机理以及探索该类病毒病害防治新途径有着重要的理论和实际意义。