獐牙菜苦苷促肝脏胆酸转运蛋白MRP3高表达治疗胆汁淤积的实验研究

胆汁淤积是多因素所致肝损害的常见、严重并发症，肝细胞膜转运蛋白表达异常为其发病的分子基础。我们前期研究发现，胆酸转运蛋白MRP3在胆汁淤积中对保护肝细胞起关键作用。目前胆汁淤积症的临床治疗缺乏特效药物，我国传统中药"藏茵陈"长期用于治疗胆汁淤积，有独特功效，我们前期对其有效单体进行了分离，初步发现活性单体"獐牙菜苦苷"可刺激MRP3等转运蛋白分子高表达，其作用可能优于胆汁淤积症的常用治疗性药物"UDCA和茵栀黄"。本课题拟首先在内毒素诱导的大鼠胆汁淤积模型上，评价獐牙菜苦苷刺激MRP3高表达对胆汁淤积症的治疗效应；然后应用基因转染、体外转录活性检测和EMSA等技术，明确其上调关键分子MRP3基因转录的核受体信号通路。从而，阐明獐牙菜苦苷通过刺激MRP3高表达治疗胆汁淤积症的分子机制，可能为该并发症的临床治疗提供新的重要线索，为弘扬民族医药、保护自主知识产权具有重大的战略意义和实际应用价值。

胆汁淤积是多种因素所致肝损伤常见、严重并发症，其分子发病机制为肝细胞膜转运蛋白表达异常。目前，临床治疗胆汁淤积缺乏有效药物。UDCA是唯一一个公认的用于临床治疗的药物，但其疗效有限、副作用大。我国传统中药“藏茵陈”长期用于治疗胆汁淤积、胆石症等肝胆疾病，具有独特功效。我们前期对其有效单体进行，发现其活性单体“獐芽菜苦苷”可刺激肝细胞膜转运蛋白MRP3等分子高表达。而胆酸转运蛋白MRP3在胆汁淤积中对保护肝细胞发挥了关键作用。因此，本课题首先在大鼠胆汁淤积模型上，评价獐芽菜苦苷刺激MRP3高表达治疗胆汁淤积的效果；然后明确獐芽菜苦苷上调MRP3/Mrp3基因表达的分子机制。从而阐明獐芽菜苦苷刺激MRP3高表达治疗胆汁淤积的分子机制。已取得的研究成果如下：（1）成功构建了内毒素（LPS）诱导的胆汁淤积大鼠模型和胆道结扎的大鼠胆汁淤积模型，并在两种动物模型上证实了獐牙菜苦苷能减轻胆汁淤积；（2）在HepG2 细胞培养中，明确了獐牙菜苦苷通过可通过SP1上调MRP3基因表达的表达；（3）正常大鼠实验中，明确了獐牙菜苦苷可上调SP1基因表达以及胆汁酸转运蛋白MRP3基因的表达，并同时明确了獐牙菜苦苷可显著改变胆汁酸合成、解毒、转运相关的基因表达。研究结果证明，獐牙菜苦苷可明显降低胆汁淤积大鼠肝脏的损伤，其可能通过转录因子SP1明显上调胆酸转运蛋白MRP3的表达。此外，獐芽菜苦苷还可显著改变肝脏胆汁酸合成、解毒、及转运相关的基因表达。