桃红四物汤对兔皮片移植模型Notch信号通路及相关因子表达的影响

Auto skin grafting, although the surgery is simple and effective skin defects, but it is easy to have postoperative complications, and the mechanism of skin grafts angiogenesis is not very clear. Domestic and foreign research have confirmed the Notch signaling pathway plays an important role in angiogenesis, but for its specific role in skin transplantation survival mechanism was not elucidated. Skin transplantation is a qi and blood stasis,with promoting blood circulation to remove blood stasis of TCM treatmentAnimal,the pilot study confirmed effective.So we take the rabbit skin graft model as the research object, through detection the gene and protein expression of Notch signaling pathway related moleculars and angiogenesis factors of promote and suppressor in the skin,discuss with promoting blood circulation to remove blood stasis legislation Taohongsiwu decoction to intervention of Notch signaling pathways, in order to find out the pathway specific links and factors related to angiogenesis, and promote the curative effect of flap survived interpreted mechanisms, for its widely used in clinical provide a more solid theoretical foundation and scientific basis.

自体皮片移植术，虽然手术简单并能有效修复皮肤缺损，但是容易出现术后并发症，而且目前我们对移植皮片血管新生的机制研究还不十分清楚。国内外研究已证实Notch信号通路在血管新生中的重要作用，但对其在移植皮片成活中的具体作用机制未阐明。皮片移植术后证属气滞血瘀，中医用活血化瘀治疗，经前期研究证实确实有效，因此我们以兔皮片移植模型为研究对象，通过检测皮片中Notch信号通路相关分子和血管新生促进及抑制因子的基因及蛋白表达情况，探讨以活血化瘀立法的桃红四物汤对Notch信号通路的干预作用，以期能找出其对通路具体环节和血管新生相关因子的影响，并对其促进皮片成活的疗效机制加以阐释，为其在临床的广泛应用提供更为坚实的理论基础及科学依据。

皮肤覆盖着整个人体，约占人体体重的8％，每年数以百万的人由于烧烫伤、化学腐蚀、射线照射及疾病等原因导致皮肤创伤，造成皮肤缺损。国内外研究已证实Notch信号通路在血管新生中的重要作用，但对其在移植皮片成活中的具体作用机制未阐明。皮片移植术后证属气滞血瘀，中医用活血化瘀治疗，经前期研究证实确实有效。本项目以兔皮片移植模型为研究对象，采用免疫组化、ELISA、Western-blot及RT-PCR检测观察指标，研究发现：（1）Notch信号通路受体（Notch1、Notch4）、配体（Jagged1、Jagged2、Dll1、Dll3、Dll4）、下游靶基因（HES1、HES2）、血管新生促进因子（VEGF、VEGFR-2、ANG、成纤维细胞生长因子）、基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）在移植皮片中表达明显并与血管新生关系密切；而Notch2、Notch3、Dll2、HRT1、HRT2则表达不明显。（2）桃红四物汤能上调移植皮片组织中Notch1、Notch4、HES1、HES2、VEGF、VEGFR-2、Ang、成纤维细胞生长因子表达从而促进血管新生。（3）Jagged1可在血管前期促进血管萌芽，而Dll4可在血管新生中期可抑制血管过度萌芽。（4）桃红四物汤不同剂量组在术后第8d移植皮片组织中MMP-2、MMP-9含量均高于术后第2d和术后第5d。基于以上研究结果，本项目证实桃红四物汤可以通过Notch信号通路影响血管新生，增加移植皮片VEGF、VEGFR-2、血管生成素、成纤维细胞生长因子、MMPs的表达，从而促进皮片成活。阐明了Notch信号通路在移植皮片血管新生中的重要性及科学内涵，并证实了以活血化瘀立法的桃红四物汤对Notch信号通路的干预作用，以及治疗皮肤缺损的科学理论依据。