ERK1/2，p38MAPK在CD24调节结直肠癌增殖和侵袭过程中的作用及调控的分子机制

CD24，Src家族，MAPK信号通路均为结直肠癌发病机制中的重要分子，在结直肠癌诊治分子标志物及分子靶向治疗药物的研发中具有重要意义，目前其相互之间的信号通路网络关系并不十分清楚。本课题组的前期工作初步提示CD24可能参与调控结直肠癌的增殖和黏附能力，ERK1/2、p38MAPK则在这一过程中发挥一定的作用。本研究通过体内和体外实验进一步系统探讨CD24在结直肠癌增殖和侵袭过程中的作用，明确ERK1/2、p38MAPK在这一过程中的调节机制，通过人体组织标本的免疫组化和临床病理学分析评估三者联合对结直肠癌的预测作用，并初步探讨Src家族在这一调节过程中的作用和机制。研究结果将完善CD24和MAPK信号传导通路理论，最终为明确结直肠癌发病机制及新的分子靶标的确立提供实验数据。

课题进展顺利，可以按期结题。课题前期工作发表SCI收录论文1篇，项目开展后发表相关论文3篇，其中SCI收录论文1篇，核心期刊收录论文2篇，1篇论文摘要被“美国消化病周”（DDW）接受为大会发言，1篇英文论文正在审稿，培养硕士研究生1名（已毕业），1名博士研究生（在读）。在研究中，课题组通过体内和体外实验证实CD24可以诱导肠癌细胞的增殖和侵袭能力。体外机制研究发现 （1） CD24可以上调p-Lyn的表达，激活ERK1/2，而抑制Lyn的活性后，CD24所诱导的ERK1/2的激活亦受到抑制。（2）细胞免疫荧光及蛋白免疫印迹实验结果提示CD24可以诱导Lyn发生核转位。（3）免疫共沉淀提示CD24与Lyn、Lyn与ERK1/2之间存在着相互作用，而CD24表达下调可抑制Lyn与ERK1/2的相互作用。（4）功能实验证实Lyn参与CD24对肠癌细胞生物学功能的调控。体内实验：在BALB/c裸鼠肝转移模型中，SW480CD24组肝转移瘤数目及面积较SW480vec组明显增加，差别有显著性意义，提示CD24在肿瘤侵袭转移过程中的重要作用。人体组织样本的研究显示 CD24与Lyn均与肿瘤的分级、分期、淋巴结转移及远处转移相关，且CD24的表达与Lyn的表达相关；相对于CD24或Lyn高表达患者来说，其低表达的患者的有更高的生存率（P <0.05）；进一步增加样本量后，COX模型分析提示CD24的表达可作为结直肠癌的独立预后因素（P>0.05），但Lyn不是其独立预后因素。为进一步阐明CD24调节肿瘤细胞生物学特性的细胞传导网络以及诱导侵袭转移的机制，课题组分别在293T细胞及肠癌HT29细胞中免疫沉淀CD24相互作用蛋白并进行质谱（mass spectrometry analysis）鉴定，获得一系列潜在的CD24相互作用蛋白，其中包括与肠癌侵袭转移密切相关的重要“分子伴侣”蛋白-- Hsp90，免疫共沉淀实验进一步证实CD24和Hsp90具有直接或间接的相互作用。 本研究系统完善地探讨了CD24在大肠癌生物学特性调控过程中的重要作用，为其作为肿瘤诊治的靶标奠定了理论基础，同时，系统阐述了其相关的信号网络系统，将CD24同大肠癌诊疗的重要分子靶标Lyn, ERK1/2 以及Hsp90联系起来，为肿瘤“个体化”诊疗的实现提供了重要的实验依据。