小鼠孕早期雌孕激素对miRNAs表达调控及对胚胎着床的作用

The embryo implantation is the key link of successful pregnancy. Its mechanism involves the synergy of complex and delicate multiple factors between embryos and matrix. In the course of the embryo implantation, the controllable change of the endometrial cells is one of key facters for successful pregnancy. Recent research indicates that the fine regulation of miRNAs for endometrial development plays an important role in the reproductive process. However, the regulatory mechanism of miRNAs expression is still indeterminate. A study demonstrates that in the different phases of menstrual cycle there is a meticulous regulation of miRNAs for endometrial change.while , estrogen and progestogen from ovary play pivotal role in normal endometrial change of Women's menstrual cycle and the embryo implantation. We speculate that the embryo implantation may be affected by estrogen and progestogen , from which regulates some miRNAs in endometrium cell. The goal of the current study is to screen out miRNAs regulated by estrogen and progestogen and investigate its mechanism with the help of the combination of miRNAs chip and gene chip technology and bioinformatics analysis,setting up mouse model of different Pregnancy phases and hormone levels . From a new perspective to explore the regulation of miRNAs on embryo implantation. This study will lay foundation for infertility pathogenesis research under normal hormone,seeking a new diagnosis target of infertility and improving the success probability of assisted reproduction .

胚胎着床是妊娠成功的关键环节，其机制涉及胚胎与母体之间及其复杂而精细的多因素协同作用。在胚胎着床过程中，子宫内膜细胞有控性改变是决定妊娠成功与否的关键之一。研究表明，miRNAs对于子宫内膜的精细调控在生殖过程中发挥着重要作用。而miRNAs表达的调控机制却并不明确。研究表明女性的月经周期不同时段，miRNAs精细调控子宫内膜改变；而雌孕激素对女性的月经周期中子宫内膜正常改变起着关键作用，同时在胚胎着床中发挥决定性作用。我们推测雌孕激素通过调控子宫内膜中的miRNAs表达，决定胚胎着床。本研究通过建立不同妊娠状态和激素水平的小鼠动物模型，运用miRNAs芯片和基因芯片技术相结合，通过生物信息学分析，筛选出雌孕激素调控的miRNAs，并研究其作用机制。从一个新的视角探索胚胎着床的调控作用。为在正常激素状态不孕不育症发病机制的研究、寻找不孕不育诊断的新靶标和提高辅助生育成功率打下基础。

完成了本项目计划书的研究内容，取得了以下主要成果：.1．.早孕小鼠孕1天、孕4天、孕5着床、孕5天着床旁和孕6天组子宫内膜的数字基因表达谱分析结果为：（1）孕4天、孕5着床、孕5天着床旁和孕6天与孕1天比，差异表达2倍以上的基因数分别为3806个、4898个、3957个和3729个；（2）孕5着床与孕5天着床旁比，差异表达2倍以上的基因数为2262。.2．.早孕小鼠孕1天、孕4天、孕5着床、孕5天着床旁和孕6天组子宫内膜的miRNAs测序分析结果为：（1）孕4天、孕5着床、孕5天着床旁和孕6天与孕1天比，差异表达2倍以上的miRNA数分别为247个、245个、324个和217个；（2）孕5着床与孕5天着床旁比，差异表达2倍以上的miRNA数为169。.3．.激素处理各组的子宫内膜数字基因表达谱分析分析结果为：E2、P4、E2P4联合处理组与对照组比，差异表达2倍以上的基因数分别为3372个、1309个和3450个。.4．.激素处理各组的子宫内膜miRNA测序分析结果：E2、P4、E2P4联合处理组与对照组比，差异表达2倍以上的数分别为117个、21个和37个。.5．.生物信息学分析表明，激素调控的miRNAs可能通过负性调控与细胞增殖和细胞黏附等有关基因的表达，影响胚胎着床。.结果表明，部分miRNAs的表达受到激素的影响，且参与调控与细胞增殖和细胞黏附等有关基因的表达，影响胚胎着床。同时我们也注意到，胚胎对子宫内膜细胞中的一些基因和miRNAs的表达同样也发挥着重要作用。