HDAC9基因多态性参与动脉粥样硬化性脑卒中自噬途径的机制研究

Atherosclerosis plays an essential role in the pathogenesis of acute ischemic stroke. It is accepted that the HDAC9 gene has close association with atherosclerotic stroke and the specific reasons is not clear. Studies show the HDAC9 related mutations cause abnormal activation, which can affect the expression of autophagy-related gene of the HDAC9 gene. As a result, the mutation either inhibits or over-activates cell autophagy. Our previous research further discovered that HDAC9 may mediate autophagy through the binding of autophagosome and lysosome.While the autophagy dysfunction plays an important role in atherosclerotic stroke, but there is no report regarding whether the regulation of autophagy pathway by HDAC9 is involved in the formation of atherosclerotic stroke.Therefore, this paper combines cell morphology, cell cuture, Western Blot, Real-time PCR, live cell station and microarray, to discusses the molecular mechanism of HDAC9 gene polymorphism affecting atherosclerotic cerebral stroke pathology.We will clarify the association between HDAC9 gene polymorphism between and the autophagy dysfunction in atherosclerotic stroke.This study will further reveal the pathogenesis of atherosclerotic stroke, and provide novel ideas and drug targets for its prevention and treatment.

动脉粥样硬化是急性缺血性脑卒中发病的关键因素。研究表明组蛋白去乙酰化酶9基因（HDAC9）中的等位基因rs11984041与粥样硬化性脑卒中密切相关，具体机制不清。HDAC9基因突变可能影响自噬相关基因的表达，从而抑制或过度激活细胞自噬。我们的前期研究已证实，HDAC9可能通过介导自噬体与溶酶体结合促进细胞自噬。而细胞自噬功能异常在动脉粥样硬化性脑卒中发生中担当重要角色，但HDAC9是否通过调控细胞自噬途径参与了动脉粥样硬化性脑卒中的形成，目前未见报道。据此，本课题拟应用细胞培养、转染、细胞形态学、活细胞工作站、Real-time PCR及microarray等方法，阐明HDAC9基因多态性与动脉粥样硬化性脑卒中自噬异常的相关性，探讨HDAC9基因多态性影响动脉粥样硬化性脑卒中自噬的分子机制。本研究将进一步揭示动脉粥样硬化性脑卒中的发生机制，为其有效防治提供新思路和药物作用的新靶点。

背景和方向：动脉粥样硬化是大动脉性脑梗死的病理基础，自噬参与动脉粥样硬化的发生，有研究表明在大动脉粥样硬化中与自噬密切相关的HDAC9基因在病例对照研究中存在显著性差异提示着HDAC9调控的自噬异常可能参与了动脉粥样硬化性脑卒中的形成。因此我们通过研究HDAC9表达异常与细胞自噬功能异常的相关性，来探索HDAC9调控细胞自噬对动脉粥样硬化形成的机制。.主要内容：在此研究中，我们通过慢病毒转染调控了HDAC9在人血管平滑肌及内皮细胞中的表达，并通过OX-LDL脂质诱导两种细胞动脉粥样硬化，对比观测了细胞凋亡、细胞泡沫化、自噬通路调节以及下位自噬相关基因的表达。.结果：（1）在hBMECs中，HDAC9的表达上调与下调时均明显抑制细胞自噬，同时伴随着细胞凋亡率增加。（2）在hBVSMCs中，下调HDAC9的表达可抑制细胞自噬,进而降低细胞泡沫化；上调HDAC9可过度强化细胞自噬，进而增加细胞泡沫化，对自噬的调节与调控ATG5基因的表达相关。HDAC9的表达异常可抑制hBMECs的细胞自噬，增加细胞的凋亡率，促进动脉粥样硬化的发生。HDAC9的表达与hBVSMCs的细胞自噬相关，通过影响细胞的泡沫化程度，进而影响了动脉粥样硬化的发生，其对自噬的调节与ATG5基因的表达具有相关性。.科学意义：从遗传学的角度更深入的了解动脉粥样硬化的形成，为避免此疾病的发生寻找新的突破方向。