类产碱假单胞菌杀虫蛋白基因的分离与鉴定

类产碱假单胞菌是一种新昆虫病源物，其代谢产生的蛋白质对蝗虫具致死作用。本项目研究了类菌杀虫蛋白的二级结构和N末端氨基酸序列，合成了核苷酸探针，制备出高抗血清构建了基因组文库，经筛选和验证，克隆到类菌的杀虫蛋白基因，测定了其核苷酸序列，该基因编码276个氨基酸残基，推测的氨基酸序列包括22个氨基酸残基构成的信号肽和254个氨基酸残基构成的蛋白质序列，G+C碱基含高达62%。经检索表明，该杀虫蛋白与其它细菌毒素蛋白之间无明显的同源性，也未发现与该杀虫蛋白基因相似的核苷酸序列，故认为类菌杀虫蛋白和杀虫蛋白基因均为新发现，杀虫蛋白在重组质粒中表达的产物与原天然杀虫蛋白一致、重组质粒培养液对蝗虫的致死率达到47%。