本研究利用核酶可序列特异地切割RNA的特点,设计并合成针对bcl-2 mRNA癌基因的锤头状核酶基因,体外测活表时,所设计核酶具有很强的定点切割bcl-2 mRNA的活性。我们先后构建了两 种真核表达载体PKOR-RZ 和PMTRN,前者为核酶基因的逆转录病毒表达载体,用以转染人早幼粒白血病细胞HL-60;后者为含金属硫蛋白基因启动子的可诱导型表达载体,用以转染人食管癌细胞Eca109.转染了PDOR-RZ的HL-60细胞伴随着核酶的表达而细胞Bcl-2蛋白水平下降,生长受抑制,流式细胞仪分析显示出凋亡峰,细胞DNA凝胶电泳呈现反映细胞凋亡特征的梯状条带,电镜下可见明显的细胞凋亡。PMTRN转染E ca109细胞后经ZnSO4诱导,亦可检测到有核酶的表达。
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数据更新时间:2023-05-31
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