群体PK/PD法考察肾移植患者活化T细胞、调节T细胞和免疫抑制剂的关系

肾移植术后免疫抑制剂的合理使用是移植物长期存活的关键。由于该类药物治疗窗窄、个体差异大，需要治疗药物监测和个体化给药。现有的监测手段主要是测定血药浓度，而非监测药物对免疫功能方面的效应，缺乏患者免疫反应实时变化的监测和免疫抑制剂关系的定量研究。本研究旨在应用群体药动学/药效学模型方法，考察肾移植术后活化T细胞表面分子CD69、CD25、CD71及细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2的表达，CD4+CD25+ Foxp3+ 调节T细胞和相关细胞因子TGF-β、IL-10动态变化，描述上述生物标志物和免疫抑制剂的数学关系，考察相关的影响因素，获得国人肾移植患者的群体PK/PD的参数值，为制定个体化的治疗方案提供依据。

背景和目的.肾移植术后常用免疫抑制剂抗排斥治疗。该类药物治疗窗窄、个体差异大，需要治疗药物监测和个体化给药。现有的监测手段缺乏对免疫功能效应方面的测定，故本研究采用群体药动学(PK)和药效学(PD)的方法，考察国人肾移植患者(RT)中免疫抑制剂的PK-PD特征和相关影响因素，为制定个体化给药方案提供依据。.方法和结果.首先，建立了应用定量流式细胞术同时检测人外周血中T淋巴细胞活化标记物CD69、CD25、CD71和CD4+CD25+ Foxp3+调节T细胞的方法；还建立了ELISA法检测人外周血中 IL-2、 IL-10、可溶性CD30(sCD30)和VEGF的方法，并在健康志愿者(HS)和RT中进行了方法学验证。.其次，在HS和RT中对常用免疫抑制剂进行了群体PK分析。根据采样的多寡，采用一房室或二房室模型进行建模。结果表明：RT中红细胞压积、体重、术后时间是环孢素A(CsA)和他克莫司(TAC)的PK影响因素；CYP3A4*1G和CYP3A5*3基因多态性亦可影响两者的PK，但在术后不同时期的影响是不同的。文献报道，CYP3A4/5基因多态性可影响西罗莫司(SRL)的PK，但在本研究中未见。本研究还表明：HS中麦考酚酸(MPA)的PK与SLCO1B3 334T>G显著相关，与UGT1A8*2弱相关，但在稳定期的RT中未见。RT中合用CsA、体重和术后时间可影响MPA的PK。.然后，采用细胞生命周期模型拟合PD，进行PK/PD分析。结果表明：HS中，SRL能显著抑制CD25的表达，而对Treg、IL-2和IL-10等的表达无显著影响。合用Tac的RT中，随着术后时间的延长，CD69、CD71和CD25的表达逐步上升，且在不同时期（7天~4月）有显著性差异；CD69的表达量与肝功能和性别相关；CD71的表达量与肝功能相关；胆固醇可影响CD25的表达。另对术后1~5年期的不同肾功能的RT进行考察，结果显示：CD69的表达量与年龄和体重相关；CD71的表达量与血清肌酐、结合胆红素和总蛋白相关；而CD25的表达量仅与体重相关。此外，RT中FOXP3基因rs3761548的多态性与CsA免疫抑制效应密切相关，AA较CC型患者更易发生排斥反应。.结论. 本研究初步阐明了HS和RT中免疫抑制剂的PK/PD和影响因素，为个体化治疗提供依据。