SGLT-2在前庭系统的表达及其对前庭内外淋巴液间物质转运的影响的实验研究

眩晕症是最常见的临床综合征之一。临床应用内耳局部给药治疗梅尼埃病眩晕越来越受到重视，然而其作用机制不甚明确，特别是对于药物如何从外淋巴进入内淋巴的途径亦不明确。SGLT-2是一种细胞膜转运蛋白，可转运葡萄糖，氨基酸，维生素，钠离子等。本课题组前期的研究发现鼓室内庆大霉素注射后药物在移形细胞有较多积聚，并在预实验中发现前庭系统有SGLT-2分布。我们推测移形细胞为内外淋巴交通的部位，SGLT-2是转运内外淋巴液的通道。为证实这一假说我们将应用免疫学，分子生物学等技术，从基因-蛋白两个层次观察SGLT-2在前庭系统的表达；为了解庆大霉素的作用机制及其对SGLT-2的作用，在鼓室内庆大霉素注射后检测SGLT-2的表达变化；最后应用SGLT-2阻断剂来观察庆大霉素鼓室内注射后药物分布的变化来证实SGLT-2是内外淋巴液物质的转运通道。本项目对内外淋巴物质转运机制的阐明将为内耳局部给药提供理论基础。

背景：眩晕症是最常见的临床综合征之一，药物通过内耳局部给药后能在内耳达到较高的浓度，发挥其治疗作用，同时避免了药物的全身副作用。然而其作用机制不甚明确。前期研究已明确鼓室内庆大霉素注射后庆大霉素在内耳的时间、空间分布特点，但内外淋巴液物质的转运通道、庆大霉素的作用机制如何仍需进一步研究。.主要内容：1）SGLTs是否在内耳前庭系统的分布；2）通过圆窗、卵圆窗分别给药，观察庆大霉素-德克萨斯红(GTTR)在内耳不同器官的分布，探究药物进入内耳的途径;3)庆大霉素圆窗或卵圆窗给药后在耳蜗的分布及对听力影响的研究；4）庆大霉素鼓室内注射是否对前庭暗细胞有直接影响而减轻内淋巴积水，从而进一步探讨前庭内外淋巴物质交通；5）通过核磁共振成像探索眩晕、听力下降、耳鸣和耳聋等一系列诊断梅尼埃病的临床表现与MD患者内耳内淋巴积水之间的关系。.重要结果：1.SGLT-2在前庭系统无表达；SGLT-1分布在半规管壶腹，毛细胞和移行细胞表面均见分布，暗细胞区未见分布；2. GTTR在圆窗或卵圆窗局部给药后，在内耳终末器官的分布存在差异性。两种给药方式在内耳各终末器官均有分布，且圆窗组药物进入多于卵圆窗组。GTTR在球囊斑的聚集最高；3. 庆大霉素圆窗给药对听力的影响较镫骨区给药显著，以高频听力损失为主；4. 庆大霉素对暗细胞没有明显破坏，不能减少内淋巴分泌从而减轻内淋巴水肿。临床资料证明庆大霉素注射前后患者耳胀症状无明显变化；5. 双鼓室内注射钆内耳显影可直观并且准确地观察到梅尼埃病人的内淋巴积水情况。梅尼埃病患者的内耳内淋巴积水具有逐渐恶化的倾向。患者的低频和中频听力下降与内耳内淋巴积水有关。.科学意义：本课题联合形态学和功能学的结果以及临床资料，提供了探索药物作用机制的新视角；通过动物实验与临床资料相结合，从新的角度了解庆大霉素控制眩晕的作用机制，为内耳局部给药方案的优化提供理论依据。