体外、体内系统研究NUDC和TPO通过Mpl受体的介导协同刺激巨核细胞的成熟及加速血小板生成

人体NUDC是本实验室发现的TPO受体（Mpl）的另一枚配体。初步结果表明NUDC和TPO两枚配体都与Mpl受体的胞外区结合，因此过去几年来大量工作集中在证明NUDC是否具有TPO 类似的功能。经研究证实，NUDC的确能促进小鼠血小板的生成并能促进体外巨核细胞的增殖和分化。但NUDC和TPO的活性部位不完全相同，前者主要作用在巨核细胞的成熟期，增殖能力相对较弱。而TPO对巨核细胞的增殖能力比NUDC强得多。结合过去的结果即TPO基因只在造血干细胞和婴儿肝脏这些早期造血组织中表达，并已证明它主要在巨核细胞发育前期增殖阶段起作用。而我们结果表明NUDC mRNA和蛋白均在不同时期巨核细胞分化系列中存在。我们推测，NUDC和TPO分别在巨核细胞发育的不同阶段选择性地与Mpl结合而发挥它们各自功能。本项目将在体内体外对两配体协同刺激巨核细胞的成熟从而诱导血小板生成进行研究。

人体hNUDC是过去几年由本实验室发现的TPO受体（Mpl）的另一枚配体。最近研究表明，hNUDC具有TPO相似的活性，即能促进小鼠血小板的生成并能促进体外巨核细胞的增殖和分化。但hNUD和TPO的活性部位不完全相同。当hNUDC单独使用时，增殖能力相对较弱，主要作用在巨核细胞的成熟期。而TPO对巨核细胞的增殖能力比hNUDC强得多。本项目用大量数据证实了我们推测，即hNUD和TPO分别在巨核细胞发育的不同阶段选择性地与Mpl结合而发挥它们各自功能。结果表明hNUDC和TPO不但在体外而且在体内都表现了协同刺激巨核细胞的成熟从而诱导血小板生成。用小鼠骨髓细胞同时添加hNUDC和TPO，发现mNUDC + mTPO 处理比单独处理明显增加了巨核细胞增殖能力，同时巨核细胞的表面成熟标记CD61以及DNA当量数也明显增加。这些结果说明hNUDC 和TPO在巨核细胞分化具有一定的协同作用。另外，体内协同注射hNUDC和TPO后，小鼠血小板量比单独注射高几倍。尽管hNUDC和TPO在血小板生成过程中协同机制还有待进一步研究，我们认为NUDC和TPO协同使用为未来治疗各种血小板减少症性的提供了一个崭新思路。