PDGF-D在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用及机制研究

PDAC is a devastating disease with a 5-year survival rate of <7% mainly due to late diagnosis and resistance of the disease to its first line drug, gemcitabine. In our previous studies, we found that PDGF-D gene is hypomethylation and its expression up-regulated in gemcitabine-resistant PDAC cells by whole genome reduced representation bisulfite sequencing, whereas knockdown of PDGF-D reversed gemcitabine resistance of PDAC, suggesting that PDGF-D plays an important role in gemcitabine resistance of PDAC. Therefore, our present proposal will verify the promotion effects of PDGF-D on gemcitabine resistance of PDAC, investigate the pivotal molecular event of PDGF-D-mediated promotion of gemcitabine resistance in PDAC, clarify the molecular mechanism of up-regulation of PDGF-D in gemcitabine-resistant PDAC cells, and seek feasible strategies of targeting PDGF-D/PDGFR--β signal to reverse the resistance of PDAC to gemcitabine. The study of this project can provide a new molecular target for reversing the resistance of PDAC to gemcitabine and developing a novel strategy with practical application value.

胰腺导管腺癌（PDAC）是常见的消化系统恶性肿瘤，预后极差，5年生存率不到7%。吉西他滨是治疗PDAC的一线化疗药物，然而化疗耐药导致治疗失败是PDAC临床治疗的主要难题。我们前期采用全基因组RRBS测序发现PDGF-D在PDAC耐药细胞中低甲基化导致其上调表达，干扰PDGF-D能够逆转PDAC吉西他滨耐药，提示PDGF-D甲基化修饰在PDAC吉西他滨耐药发挥了重要作用。据此，本项目拟在前期工作的基础上，从分子、细胞、裸鼠和临床组织标本四个层面，进一步明确PDGF-D促进PDAC吉西他滨耐药的作用及临床意义；解析PDGF-D促进PDAC吉西他滨耐药的关键分子事件；阐明PDGF-D在PDAC吉西他滨耐药细胞中上调表达的分子机制；探求靶向PDGF-D/PDGFR-β信号逆转PDAC吉西他滨耐药的可行措施。本项目的研究可为逆转PDAC吉西他滨耐药提供新的靶点并开辟一条有实际应用价值的新策略。

胰腺导管腺癌（PDAC）是常见的消化系统恶性肿瘤，预后极差，5年生存率不到7%。吉西他滨是一种传统的化疗药物，是局部晚期或转移性PDAC的一线治疗药物。然而，吉西他滨化疗耐药导致治疗失败是PDAC临床治疗的主要难题。探究吉西他滨在PDAC中耐药的分子机制是解决这一难题的关键。在本研究中，采用代表性亚硫酸氢盐测序技术（RRBS）对亲本细胞MiaPaCa-2、吉西他滨耐药细胞G3K及吉西他滨耐药回复性细胞Rev的基因组DNA进行测序分析，发现有65个基因启动子发生明显可逆性甲基化，其中耐药细胞G3K呈启动子低甲基化状态的PDGF-D表达显著上调。通过构建干扰及过表达PDGFD的吉西他滨耐药细胞株，从分子、细胞、动物水平证实了表达上调的PDGFD以自分泌和旁分泌的方式激活STAT3信号促进PDAC吉西他滨耐药。结合公共数据库分析显示，PDGFD异常表达与PDAC患者的不良预后密切相关。本研究为PDGFD信号作为改善PDAC吉西他滨治疗耐药性的潜在靶点提供了实验基础和理论依据。