高迁移率族蛋白B1对线粒体融合蛋白2表达的影响及其介导的细胞免疫效应

高迁移率族蛋白B1（HMGB1）作为一种晚期炎症因子和免疫调节分子，在脓毒症免疫紊乱发生中具有重要作用。我们前期研究发现，HMGB1能明显抑制免疫应答的关键效应细胞- - CD4+T细胞的增殖与活化，但其机制尚不清楚。新近发现，线粒体融合蛋白2（Mfn2）与介导T淋巴细胞活化、增殖、极化的重要信号通路Ca2+途径关系密切，并可能由此而参与HMGB1对CD4+T细胞免疫功能的调节过程。本项目通过体外实验研究HMGB1对CD4+T细胞免疫功能及Mfn2表达的影响，并构建Mfn2过表达和基因沉默细胞模型，探讨Mfn2在HMGB1调节CD4+T细胞免疫功能中的作用。同时进一步观察调节Mfn2表达后Ca2+-CaN-NFAT1/2通路的变化及该通路特异性抑制剂或激动剂的干预作用，探讨Mfn2介导CD4+T细胞免疫功能改变的信号通路。预期为脓毒症的免疫调控治疗提供新的理论依据和潜在靶标。

脓毒症是由感染引起的致命性全身炎症反应综合征。已经证实，脓毒症在早期短暂促炎反应后伴随长时间的免疫抑制状态，并与脓毒症的预后密切相关。新近发现，高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的过量表达是导致创伤及脓毒症中细胞免疫功能障碍发生的关键因素。但迄今为止，HMGB1对获得性免疫功能的影响和机制尚不清楚。本项目着重分析HMGB1对获得性免疫应答关键细胞—“CD4+T淋巴细胞”免疫功能和凋亡的影响，进一步探讨其可能机制。项目研究发现：（1）高剂量HMGB1能够显著抑制CD4+T淋巴细胞增殖，且能够诱导细胞由Th1向Th2转化。此外研究证实，线粒体融合蛋白2在HMGB1介导CD4+T淋巴细胞免疫功能改变中发挥着重要作用。Mfn2对CD4+T细胞免疫功能的影响是通过Ca2+ - CaN - NFAT信号途径实现的，与MAPKs信号无关。更为重要的是，研究发现Mfn2能够结合并调节钙通道蛋白STIM1/ORAI1表达，这可能是Mfn2对细胞钙离子影响的关键环节。（2）HMGB1能够剂量/时间依赖性诱导T淋巴细胞凋亡，该效应与HMGB1抑制Mfn2表达后，线粒体凋亡途径的激活有关。维持Mfn2的表达水平能够有效减低HMGB1介导线粒体膜电位降低，同时下调了T淋巴细胞的凋亡水平。有鉴于CD4+T淋巴细胞在调节和维持自主免疫功能中的重要作用，本研究为严重创/烧伤、脓毒症等涉及CD4+T淋巴细胞免疫功能障碍疾病的治疗提供了新的靶点和依据。