基于连接酶介导纳米探针凝集的单核苷酸多态性检测技术研究

单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）是指基因组水平上由于单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，其检测在生物医学研究、临床检验与诊断、遗传疾病治疗和新药研发等方面具有重要意义。本项目拟利用DNA连接反应速率对等位基因匹配与否的特异性，发展以连接酶介导纳米金探针凝集为基础的快速、高效、可目视法直接均相检测的SNP分析技术；建立在复杂介质中稳定性好的纳米金探针的制备方法，研究连接酶在纳米金凝集结构中的催化活性，建立聚合酶链扩增反应与连接酶放大反应中的SNP实时检测方法；考察纳米金凝集结构尺寸与分析信号灵敏度的关系，建立以吸收光谱、共振光散射为基础的斑点测量法等探针凝集结构的高灵敏检测新方法；发展多色纳米金探针凝集分析、微孔阵列的斑点扫读分析及温度差示分析等多目标、多样品快速SNP检测技术，为生物医学分析提供简便、可靠、高效的SNP分析平台。