RANK-RANKL信号调控Th17分化和功能在肝脏移排斥反应中的作用研究

Th17 is a newly discovered subgroup of CD4+ T cell and its role in transplant rejection has received extensive attention. Clinical studies showed that increased serum IL-17 after liver transplantation is often accompanied with the occurrence of chronic rejection, and the proportion of RANKL+ lymphocytes, which secrete plenty of IL-17, in peripheral blood increased significantly. It implicated that RANKL signal is relevant with differentiation and function of Th17. In vitro preliminary study confirmed that RANKL signal involved in the regulation of Th17 differentiation and function. But the exact mechanism and whether it can be utilized in the treatment of liver transplant rejection are still unknown. Based on this, the subject is to study the effect of RANKL signals on the regulation of Th17 differentiation, phenotype and function; to elucidate the effect of RANKL signal on Th17 immunological function during antigen presenting; to observe the effect of reinfusing Th17 which activate or inactivate RANKL signal on all-DTH by setting Rag-2-/-mice as recipients; to research the effect and mechanism of RANKL signal on Th17-involved rejection, for a better understanding of the effect of Th17 differentiation and functional regulation in transplant rejection.

Thl7是新发现的一类CD4+T细胞亚群，在移植排斥包括慢性排斥中的作用已受到广泛关注。我们在临床研究中发现肝移植术后血清IL-17升高常伴随排斥反应发生，此时患者外周血RANKL+淋巴细胞的比例明显增加，这部分细胞分泌IL-17能力较强，提示RANKL信号与Thl7分化及功能有一定关系,体外预实验证实RANKL信号参与调控Th17分化及功能，但具体机制如何？体内是否有相似作用以及是否可以作为肝移植排斥干预靶点？尚不清楚。基于此，本课题拟研究RANKL信号对Th17分化、表型和功能的影响及机制；抗原提呈过程RANKL信号对Th17免疫学功能的影响及机制；Rag-2-/-小鼠为受者观察活化或抑制RANKL信号的Th17回输后，allo-DTH的变化；建立小鼠肝脏移植模型观察RANKL信号对Th17参与排斥反应的影响及机制，为进一步认识肝移植排斥发生机制并探寻干预策略提供新的途径及实验数据。

Th17 是新发现的一类CD4+T 细胞亚群，在移植排斥包括慢性排斥中的作用已受到广泛关注。我们在临床研究中发现肝移植术后血清IL-17 升高常伴随排斥反应发生，此时患者外周血RANKL+淋巴细胞的比例明显增加，这部分细胞分泌IL-17 能力较强，提示RANKL 信号与Th17 分化及功能有一定关系,体外预实验证实RANKL 信号参与调控Th17 分化及功能， 我们通过研究发现RANK通路在Th17细胞中并不发挥关键的调控作用，因此我们集中开展了RANKL对于DC细胞的作用研究。特别是对我们发现的调控DCs细胞的关键微小RNA miR-144进行了详细研究。研究结果显示，miR-144高表达后促进了NF-κB中P65的磷酸化，而对MAPK通路无影响，miR-144通过靶向RNAKL 3’UTR区域的679-685结合位点，对TLR4/NF-κB途径中的活化因子发挥负调控作用，其发挥负调控作用的方式为：miR-144不降解RNAKL的mRNA，而通过抑制RNAKL mRNA的翻译来实现负调控作用。另外，我们建立一种小鼠肝脏持续低灌注模型，模拟心死亡器官捐献前的供肝状态，并研究持续低灌注肝脏对热缺血再灌注损伤的耐受性，并发现RANK-RANKL信号通路在其中发挥重要作用。本课题研究了RANKL 信号对Th17 分化、表型和功能的影响及机制；抗原提呈过程RANKL 信号对Th17 免疫学功能的影响及机制；Rag-2-/-小鼠为受者观察活化或抑制RANKL 信号的Th17 回输后，allo-DTH 的变化；建立小鼠肝脏移植模型观察RANKL 信号对Th17 参与排斥反应的影响及机制，为进一步认识肝移植排斥发生机制并探寻干预策略提供新的途径及实验数据。