胎盘滋养细胞SHBG在妊娠期糖尿病中作用机理的研究

妊娠期糖尿病（GDM）可使母儿产生严重的并发症和近远期不良结局。GDM的发病机制仍未完全阐明，目前认为妊娠期胰岛素抵抗是GDM发病的病理生理基础。最近研究表明性激素结合球蛋白（SHBG）不仅由肝脏合成、分泌，妊娠期胎盘可产生SHBG与胰岛素抵抗相互影响在GDM发病中发挥着重要作用。本课题拟通过检测GDM 孕妇和胎儿/胎盘SHBG基因(TAAAA)n多态性，研究其与血清、胎盘组织中SHBG浓度和胰岛素抵抗的关系；通过RNA干扰与基因沉默技术研究胎盘滋养层合体细胞中SHBG的自分泌作用机制；通过胎盘滋养层合体细胞胰岛素抵抗模型的建立，研究SHBG对其胰岛素信号的转导和胰岛素抵抗的影响。以探讨胎盘滋养细胞SHBG在GDM中的作用机理。

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)近些年发生率逐年上升，其发病机制仍未完全阐明。研究表明性激素结合球蛋白(Sex Hormone Binding Globulin，SHBG)在GDM发病中起重要作用，本项目旨在研究SHBG在GDM中的作用机理，为GDM的筛查、诊断、治疗以及预后的判定提供理论依据。实验主要从SHBG基因启动子(TAAAA) n重复多态、胎盘滋养层细胞中SHBG自分泌功能及SHBG与胰岛素信号的转导和胰岛素抵抗关系三方面展开系统研究。本项目发现外周血中SHBG基因启动子(TAAAA)n重复多态呈8/8、8/9基因型（长链重复基因型）的妇女GDM患病的概率增大(x2=12．34，P<0．01)，而胎盘中SHBG基因启动子(TAAAA)n重复多态与GDM无关（P>0.05）。通过Elisa、RT-PCR及Western Blot方法我们发现妊娠期糖尿病患者血清和胎盘中SHBG水平均降低。采用免疫组化、PCR及Western Blot三种方法，本项目还得出胎盘中SHBG与GLU-4蛋白、IRS-1表达蛋白，IRS-2 mRNA，PI3Kp85蛋白呈正相关。应用RNA干扰与基因沉默技术沉默滋养层合体细胞内SHBG基因（RT-PCR、Western Blot验证低SHBG及SHBGmRNA表达），本项目发现沉默SHBG表达可导致滋养层细胞过度凋亡，抑制滋养细胞增殖的增殖活性。现已成功建立胎盘滋养层合体细胞胰岛素抵抗模型，SHBG对其胰岛素信号的转导和胰岛素抵抗的影响正在研究中。本项目为妊娠期糖尿病的早期预测、发现及治疗提供新的研究方向。