CMLC-McAb基因克隆及其在心肌损伤中的应用

采用杂交瘤细胞融合技术制备出8株杂交瘤细胞，选择了分泌CMLC-MCAb的ZE9和分泌CMHC-McAb的1E12进行了细胞总RNA的提取，经反转录分别合成了相应的CMLC-McAb和CMHC-McAb的cDNA。实验实合成了一对抗体通用引物。经PCR扩增后获得两个340bP的cDNA片段。以Puc19质粒为载体，分别构建了含有CMLC-McAb和CMHC-McAb轻链可变区（VL）cDNA的PMLA2和PMHA，系列，经α-互补实验检查，小量制备质粒DNA限制性酶切分析及重组质粒中DNA目的基因的PCR扩增字确认重组质粒中插入有目的基因，经EcoRI和PstI双酶切后，构建了表达载体PBVLA2和pBVHA1。转化宿主菌后进行了表达。由于表达量较低，尚需进一步构建高效表达载体。