抗结核特异抗体靶向造影剂对免疫缺陷性结核病诊断的动物实验研究

本课题拟制备抗结核特异性抗体，并与碘离子耦联合成一种新型的特异性结核靶向造影剂，先进行特异靶向抗体与结核抗原结合的体外实验，评价其生物活性，并进行靶向造影剂的药代动力学和毒理学研究，筛选最为有效的靶向造影剂。然后将其注入免疫抑制大鼠结核感染模型体内，让其定向聚集在结核病灶中；应用Micro-CT动态扫描，探讨最佳扫描时相和强化特征；与病理为对照，观察这种新型靶向造影剂对免疫缺陷动物结核模型病灶的检测敏感性、特异性和准确性。本课题首次制备具有良好结核抗原性的结核单克隆抗体靶向造影剂，期望能有效提高免疫抑制大鼠结核病灶的检出率，从而提供一种新的有效诊断免疫缺陷患者并发结核病的检查方法，为临床治疗提供更有价值的影像学信息。

1. 该课题制备了抗结核ESAT-6单克隆抗体，并与碘原子、荧光染料耦联合成两种新型特异性结核靶向探针，ELISA方法检测标记后探针具有良好免疫活性。2. 通过滴鼻法建立小鼠肺结核模型，不同监测时间点Micro-CT及病理对照分析评价模型，选取结核感染后8周作为实验模型成像的时间点。免疫组化法证实了小鼠肺结核组织表达ESAT-6抗原。应用Micro-CT、免疫荧光成像，与病理平行对照，证实了两种探针靶向到达结核病灶部位是可行的。3. 应用荧光标记抗ESAT-6单克隆抗体近红外荧光成像以及荧光显微镜观察荧光探针寻靶效果，证实了抗体从外周血管注射到达结核病灶的可行性，在国内外尚未见报道。4. 利用抗ESAT-6单克隆抗体携带对比剂，为特异性诊断结核病开辟了血清学免疫诊断之外新成像方法的探索路径。