雏鸭和成年鸭对1型鸭肝炎病毒易感性差异的研究

鸭病毒性肝炎是雏鸭的常见多发病之一，对养鸭业危害很大。但目前的研究结果还不能解释与病毒感染相关的一些关键问题，如雏鸭感染后发病而成年鸭不发病、鸭肝炎病毒的致病分子机制等。为阐明这些问题，本项目通过复制雏鸭和成年鸭感染鸭肝炎病毒的疾病模型，应用抑制性消减杂交技术筛选鸭肝炎病毒感染过程中，雏鸭和成年鸭感染鸭肝炎病毒的差异表达基因，应用病理学和免疫学技术，观察感染雏鸭和成年鸭在鸭肝炎病毒感染后不同的应答反应，从分子水平和细胞水平上研究鸭肝炎病毒对不同年龄鸭感染性的不同的原因,为鸭病毒性肝炎的防治提供新思路,同时，比较和探明雏鸭和成年鸭的免疫器官和免疫细胞的发育特点，对鸭的抗病育种起到积极促进作用。

鸭病毒性肝炎是严重影响养鸭业的疾病。已有的研究结果不能解释与病毒感染相关的一些关键问题，如感染不同年龄鸭的机制等。为更好地阐明这些问题，本项目通过复制雏鸭和成年鸭感染鸭肝炎病毒的疾病模型，运用免疫学方法和病理学方法观察组织病理变化及免疫功能的变化规律，比较不同年龄鸭感染病毒后的差异，同时利用分子生物学技术筛选鸭肝炎病毒感染过程中的差异表达基因，从分子、细胞和组织水平上研究鸭肝炎病毒对不同年龄鸭感染性的不同的机制。本项目的主要研究内容及研究成果包括：. （1）对1型鸭肝炎病毒感染不同年龄鸭的免疫病理学进行研究。对DHV感染鸭肝脏和免疫器官的组织病理学变化、IgY+细胞的分布和数量变化、TNF-α和皮质醇的含量变化进行了研究，结果表明，不同日龄鸭感染DHV后，组织病理学、IgY+生成细胞的数量和血液中TNF-α和皮质醇的含量等方面的变化有明显区别，提示提高雏鸭体内IgY+生成细胞的数量、TNF-α和皮质醇的含量可能会有助于雏鸭抵御DHV的侵袭。. （2）利用抑制性消减杂交技术构建了雏鸭组织的消减cDNA文库，获得10个差异表达基因，利用RNASeq技术获得差异表达基因1033个，并进一步研究了部分基因在病毒感染不同时期和不同组织中的表达特点。. （3）研究了细胞凋亡及凋亡相关基因在1型鸭肝炎病毒感染过程中的作用。采用TUNEL研究了病毒感染过程中的细胞凋亡，通过Real-time PCR 研究了凋亡相关基因mRNA的表达变化，揭示了病毒感染过程中细胞凋亡的分子调控机制，初步阐明了细胞凋亡可能是不同年龄鸭对1型鸭肝炎病毒感染性不同主要影响因素，为进一步研究鸭肝炎病毒的致病机制和鸭的抗病毒机制提供了依据。. （4）对细胞因子基因在1型鸭肝炎病毒感染过程中的表达进行了分析，测定了肝组织内的细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和IFN-α的转录水平和血清内细胞因子IL-1β和IL-6的表达，结果表明DHV-1感染雏鸭后大量的病毒在肝脏内增殖，引起肝组织变性和出血，同时激活肝脏内炎性细胞释放细胞因子，细胞因子在肝损伤过程中具有双向性。. 通过本项目研究，从不同水平上探讨鸭病毒性肝炎的发病机制，揭示不同年龄鸭对鸭肝炎病毒感染性不同的机制，为鸭病毒性肝炎的防治提供新思路，达到了项目预期目标。