杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与自身免疫性甲状腺病关联性的研究

自身免疫性甲状腺病（autoimmune thyroid disease,AITD）是一类器官特异性自身免疫性疾病，其发病与遗传有关，并且存在T细胞和NK细胞功能的紊乱。KIR基因是具有高度多态性的免疫调节基因家族，研究表明KIR参与NK细胞和T细胞免疫活性的调节且KIR基因多态性与多种自身免疫性疾病的遗传易感性有关。本研究拟在前期研究的基础上用PCR/SSP对正常对照人群、Graves病，桥本甲状腺炎患者KIR基因分型，通过比较KIR基因频率、基因型以及单倍型的差异，并配合HLA-I类分子分型进一步筛选AITD的易感KIR基因；应用KIR RT-PCR结合流式细胞技术分析KIR在NK细胞和T淋巴细胞的表达谱，研究KIR在表达水平与AITD的关联性,以期明确KIR基因与AITD遗传易感性的关系。同时测定NK细胞杀伤活性，初步探讨KIR在AITD发病中的免疫机制。

本课题应用PCR/SSP 对正常对照人群、Graves 病（GD），桥本甲状腺炎(HT)患者进行KIR 基因分型，通过比较KIR 基因频率、基因型的差异，并配合HLA-CW类分子分型筛选自身免疫性甲状腺病（AITD） 的易感KIR 基因、基因型、KIR/HLA基因对；应用RT-PCR 结合流式细胞技术分析KIR 在NK 细胞的表达，并测定患者NK 细胞活性，初步探讨KIR 在AITD 发病中的免疫机制。. 研究发现与正常对照人群相比：①GD患者的KIR2DS4的基因频率低，HT患者的KIR2DL5的基因频率低；② GD患者组不携带活化性KIR基因的基因型总频率高，HT患者组以抑制性KIR基因为主的基因型总频率低；③ GD患者KIR2DL1(+)HLA-CwLys(+)和KIR2DS1(+)HLA-CwLys(+)的频率均低，HT患者的KIR2DS2(+)HLA-CwAsn(+)的频率高，KIR2DL2/L3(+)2DS2(-)HLA-CwAsn(+)的频率低；④NK细胞的KIR2DS4和KIR2DL5的表达在患者和正常人群无显著性差异；⑤GD患者的CD4+T细胞及CD4/CD8比例高,NK细胞的比例低；⑥GD和HT患者的NK细胞活性均低，初步分析未发现与KIR2DS4及KIR2DL5的表达有关。. 上述结果证实KIR的基因多态性与AITD相关，GD和HT的易感基因及基因型不同。AITD存在NK细胞和T细胞的数量异常以及NK细胞的免疫活性异常，GD和HT均有NK细胞活性的降低。但易感KIR基因在表达水平与AITD的相关性及其与NK/T细胞的免疫活性的关系尚需进一步研究。