肺癌细胞促进调节性T细胞表面分子GARP（LRRC32）表达及其机制研究

CD4+CD25+ regulatory T cells (Tregs) can suppress the body`s immune response in the tumor microenviroment to promote the development and metastasis of tumor. The membrane protein GARP expressed in the activated Tregs can bind the cell growth factor TGF-beta and form a large complex GARP-mbTGF-beta which is thought to participate in the immune suppression of Tregs. In this research, the amount of GARP+Tregs, expression and spatial distribution of TGF-beta will be assayed by immunohistochemisty in tumor specimens from lung cancer patients. The results will be analyzed to determine whether GARP+Tregs have a better correlation with tumor`s development and metastasis. To investigate the mechanism that breast cancer cells activate Tregs through increasing GARP expression in Tregs` surface, a new hypothesis about tumor immune suppression will be discussed: In tumor microenviroment, cancer cells will activate Tregs by GARP to increase the immune suppression, as a result leading the development and metastasis of tumor .

肿瘤微环境中的CD4+CD25+调节性T细胞群（Tregs）可以通过抑制机体的免疫反应，从而促进肿瘤的生长和转移。研究显示活化的Tregs细胞表面分子GARP蛋白能够结合细胞因子TGF-beta，从而在Tregs细胞表面形成GARP-mbTGF-beta复合物，而该复合物则参与了Tregs细胞的免疫抑制作用。本研究希望通过检测肺癌组织中GARP+Tregs细胞数量和TGF-beta表达及空间分布，并结合临床病理资料，分析GARP+的Tregs细胞与肿瘤的进展和转移是否具有更好的相关性。此外希望通过研究肿瘤细胞促进表面分子GARP蛋白的表达进而活化Tregs细胞的机制，以期探讨肿瘤免疫抑制的新途径：肿瘤微环境中的肿瘤细胞能够促进Tregs细胞表面分子GARP的表达，从而增强肿瘤局部免疫抑制能力，促进肿瘤的发展和转移。

在肿瘤微环境中，CD4+CD25+调节性T细胞（Tregs）通过抑制T细胞以及NK细胞的增殖和免疫活性，促进肿瘤的进展和转移，从而成为肿瘤免疫逃逸的重要机制之一。而近期的研究已经证实了糖蛋白A主要区域多次重复蛋白（GARP）在活化的Tregs细胞表面高表达并且能够结合细胞因子TGF-b，从而使TGF-b成为膜结合型分子（mbTGF-b），而GARP-mbTGF-b复合物的形成是Tregs细胞发挥其抑制作用所必须的，因此认为GARP在Tregs细胞的TGF-b释放过程中发挥着重要作用。.本课题通过研究GARP在肺癌患者肿瘤组织和外周血以及健康人外周血中的表达水平，并分析其临床相关性。另一方面从体外水平研究肺癌细胞系对Tregs细胞表面分子GARP表达的影响并探索可能的机制。.本课题研究主要分为以下三个部分：.第一部分，收集39例肺癌患者的肿瘤组织，50例肺癌患者外周血和10例健康人外周血作为对照，应用流式细胞术检测GARP在Tregs及正常T细胞（Tconvs）的表达水平。结果显示，在肺癌组织中GARP在Tregs的表达水平明显高于Foxp3- Tconvs。而肺癌组织中Foxp3+ Tregs细胞比例和GARP在Tregs的表达水平明显高于外周血。此外，本研究还发现GARP的表达水平在无淋巴结转移的患者肿瘤组织中高于有淋巴结转移的患者，I期和II期患者肿瘤组织中高于III期和IV期患者，无远处转移患者肿瘤组织中高于有远处转移患者。.第二部分，体外实验探索肺癌细胞促进Tregs细胞表面分子GARP表达的可能机制。从人肺癌细胞系中筛选能够诱导Tregs细胞表面GARP表达的细胞系。结果显示A549和H520与Tregs细胞共培养后，GARP+ Tregs细胞比例明显高于其它组。进一步探索肺癌细胞系同Tregs的作用方式，发现肺癌细胞可能通过分泌某种细胞因子诱导Tregs细胞表面分子GARP的表达。.第三部分，通过TCGA数据库及体外实验结合已有的文献报道，我们发现肺癌细胞系诱导Treg细胞表达GARP的分子机制与CD39/CD73-腺苷代谢紧密相关。.综上所述，GARP在肺癌患者肿瘤组织的Tregs中的表达升高，其表达水平同淋巴结转移、临床分期与远处转移相关。而肺癌细胞系可能通过CD39/CD73-腺苷代谢信号通路从而促进Tregs表面分子GARP的表达。