基于PI3K/AKT信号通路研究新风胶囊抑制AA大鼠血小板微粒释放的机制

Rheumatoid arthritis(RA) is a basic pathological changes of synovitis and pannus formation, platelet activation after the release of platelet microparticles is an important factor in starting the pathological progression of RA .P13K/AKT signaling pathway and mediates platelet microparticles release of inflammatory mediators, cytokines, directly involved in the pathogenesis of RA. Therefore, adjusting the P13K/AKT signaling pathway controls the balance is expected to become immune inflammation, inhibit angiogenesis,thereby inhibiting a therapeutic target in RA pannus formation and bone destruction, We according to Chinese medicine, "Spleen cause stasis". Pathogenesis, create governance paralysis effect side Xinfeng Capsule(XFC), combined with previous studies based on research methods in vivo Foreign Secretary, research XFC by regulating P13K/AKT signaling pathway activity,inhibition of platelet activation,reduce the release of platelet microparticles improve the hypothesis of RA . To test this hypothesis, the systematic study of rat platelet ultrastructure in adjuvant arthritis (AA), platelet activation markers-platelet microparticles, P13K/AKT pathway variations and Jianpihuashitongluo of Chinese medicine XFC its impact clarify Xinfeng Capsule AA inhibition of rat platelet microparticles release mechanism and PI3K/AKT pathways important molecules, revealing PI3K/AKT pathways in rat platelet microparticles AA release effect.

类风湿关节炎（RA）基本病理变化为滑膜炎和血管翳，血小板活化后释放血小板微粒是RA病理进展的重要启动因素之一。PI3K/AKT通路介导的血小板释放炎性介质、细胞因子，直接参与RA发病过程。因此，调整PI3K/AKT通路的平衡可成为控制免疫炎症、血管新生，抑制RA血管翳及骨质破坏的一个治疗靶点。本课题组根据中医"脾虚致瘀"病机，创制治痹效方新风胶囊（XFC），结合前期研究基础，采用体内外结合的研究方法，研究XFC通过调控PI3K/AKT通路活性，抑制血小板活化，减少血小板微粒释放，改善RA病情的假说。为验证这一假说，系统研究佐剂关节炎（AA）大鼠血小板超微结构、血小板活化标志物-血小板微粒、PI3K/AKT通路的变化特征及健脾化湿通络中药XFC对其影响，阐明XFC抑制AA大鼠血小板微粒释放机制及PI3K/AKT通路重要分子的影响，揭示PI3K/AKT通路在AA大鼠血小板微粒释放的作用。

滑膜炎和血管翳是类风湿关节炎（RA）基本病理变化，RA血小板活化释放血小板微粒诱导免疫炎症，导致RA细胞因子网络改变，促、抑血管生长因子稳态失衡，引发RA滑膜炎症及血管新生。PI3K/AKT通路是介导血小板微粒释放反应重要通路，调控PI3K/AKT通路可降低RA血小板微粒释放，减轻炎症反应，改善促、抑血管生长因子稳态，减轻滑膜病变。本研究根据中医“脾虚致痹”、“脾虚致瘀”病机，基于RA“从脾论治”理论，通过体内、体外实验研究，采用“益气健脾通络”中药新风胶囊干预RA血小板PI3K/AKT通路，降低免疫炎症，调节促、抑血管生长因子表达，改善RA病情。为中医药改善血小板病变，抑制滑膜病变，提供实验依据。.本研究通过动物实验，研究新风胶囊（XFC）对AA大鼠关节、血小板参数、血小板微粒影响，XFC对AA大鼠细胞因子表达影响，XFC对AA大鼠滑膜组织VEGF、HIF-1α、TNF-α、ES、MVD影响，XFC对AA大鼠腹主动脉PDGF表达影响，XFC对AA大鼠腹主动脉PTEN/PI3K/AKT通路表达影响，XFC对血小板PTEN/PI3K/AKT通路表达影响。并通过体外细胞培养，研究XFC含药血清对平滑肌细胞周期影响，XFC含药血清对VSMC细胞VEGF、HIF-1α、TNF-α、ES表达影响，XFC含药血清对VSMC细胞PTEN/PI3K/AKT通路及PDGF mRNA影响。结果发现：XFC能降低滑膜TNF-α表达，下调滑膜及血管平滑肌细胞VEGF、HIF-1α表达、上调ES表达，降低滑膜MVD表达，发挥抑炎、抑制血管新生作用。XFC可通过上调血清IL-10，下调TNF-α表达，抑制炎症反应，改善血小板病变，抑制PMPs表达。XFC可通过上调血小板PTEN表达，抑制PI3K/AKT通路激活，上调BAD表达，下调BCL-2表达，降低PMPs表达。XFC可降低腹主动脉及平滑肌细胞PDGF表达，抑制PI3K、AKT、P-AKT表达，增加平滑肌细胞G0/G1期比例，减少S期比例，阻断细胞周期于G1期。说明XFC可抑制PI3K/AKT通路，抑制RA血小板微粒释放，降低免疫炎症，改善促、抑血管生长因子稳态，抑制RA滑膜病变。.本研究采用新风胶囊干预PI3K/AKT通路，抑制RA血小板微粒释放，并探讨具体其作用机制，可为中医药治疗风湿类疾病提供新思路。